DNA的复制和修复ppt课件.ppt

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1、?Reolication&RepairofDNADNA的复制和修复核酸代谢7/28/20211(一)DNA是生物遗传的物质基础——遗传信息的载体遗传学中心法则(geneticcentraldogma):描述从一个基因到相应蛋白质的信息流的途径。遗传信息贮存在DNA中,DNA被复制传给子代细胞,信息被拷贝或由DNA转录成RNA,然后RNA翻译成多肽。不过,由于逆转录酶的反应,也可以以RNA为模板合成DNA。一、基因信息的传递7/28/20212逆转录7/28/202137/28/202147/28/2

2、0215二、DNA的复制方式——半保留复制半保留复制:当DNA复制时,DNA解螺旋,双链彼此分开,均可作为模板,各自与环境中对应的脱氧核苷三磷酸以碱基互补的原则配对(A-T/C-G),组成两条新的多核苷酸链,这样一个DNA分子就可以复制成两个同样的DNA分子。7/28/20216DNA复制,双螺旋解开成单链,合成新的互补链子代细胞出现新的DNA双链其中一股单链是从亲代完整地接受另一股单链完全重新合成,且按碱基配对原则互补半保留复制意义:保持DNA在代谢上的稳定性1953,Watson、Crick7/

3、28/20217以亲代DNA为模板产生子代DNA的过程最初→半保留复制(semiconservationreplication)进一步研究:半保留复制为半不连续复制(semidiscontinuousreplication)(一)DNA的自我复制7/28/20218(二)DNA复制过程起始、延长、终止原核生物:DNA环形,1个复制起点真核生物:DNA线形,多个复制起点7/28/20219复制方式双向复制(bi-directional):大多数复制从起点开始向2个方向复制2个复制叉(replicati

4、onfork)单向复制(unidirectional):少数复制从起点向1个方向复制1个复制叉或生长点(growingpoint)7/28/2021107/28/2021117/28/202112(三)DNA复制的酶系1、解旋解链酶:1)拓扑异构酶(Topo,解超螺旋酶):解开DNA超螺旋2)解链酶(解螺旋酶):解开碱基间氢键,形成2股单链3)单链DNA结合蛋白(SSB):结合单股DNA,阻止DNA复性7/28/202113Topo解开超螺旋TopoⅠDNA单链断裂、重新连接,放松负超螺旋每次只作用

5、于一条链(催化瞬时的单链的断裂和连接)不需要能量辅因子(ATP、NAD)7/28/202114TopoⅡ同时断裂、连接双链DNA需要ATP、NADDNA旋转酶(DNAgyrase):放松正超螺旋,引入正、负超螺旋,复制中起重要作用7/28/202115TopoⅠ:切开DNA中的一条链,与另一条链解缠绕或再缠绕→连接TopoⅡ同时切开DNA双链解旋或再螺旋→连接7/28/202116本质:切断DNA磷酸二酯键改变DNA的链环数,再连接兼具DNA内切酶、连接酶的性质断裂、连接反应相互耦联不能连接事先已经

6、存在的断裂DNA解螺旋为DNA复制提供方便复制之后生成子链,再螺旋7/28/202117解链酶、SSB的作用解链酶(helicase,解螺旋酶):断裂互补碱基间的氢键,使DNA双链分离形成“复制叉”单链DNA结合蛋白(SSB):结合于解开的DNA单链,防止双螺旋再形成(阻止DNA复性)7/28/202118子链的合成必须有5’端核苷酸引物存在引物由引物酶催化合成,引物酶——特殊的RNA聚合酶引物:小段RNA,在此基础上,DNA聚合酶延长子链2、引物酶:合成小段RNA引物,用于DNA聚合酶延长子链7/

7、28/2021193、DNA聚合酶(DNApolymerase):延长子链DNA聚合酶不能从头合成子链,只能延长DNA聚合酶:多种类、多种活性7/28/2021201)DNA聚合反应条件(1)底物dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)(2)聚合酶(3)模板单链的DNA母链(4)引物寡核苷酸引物(RNA)(5)其他:解链酶,解旋酶,单链结合蛋白,连接酶7/28/2021212)DNA聚合酶(DNApolymerase)分类大肠杆菌DNA聚合酶I、Ⅱ、ⅢDNA聚合酶I:多功能酶1)沿5’→3

8、’方向延长DNA链(DNA聚合酶活性)2)由3’端水解DNA链(3’→5’核酸外切酶活性)3)由5’端水解DNA链(5’→3’核酸外切酶活性)等——常用的工具酶复制准确性的保证:复制过程中碱基的配对受到双重核对1)DNA聚合酶的选择作用2)3’→5’外切酶的校正作用。7/28/202122DNA聚合酶Ⅱ:不详DNA聚合酶Ⅲ:5’→3’方向延长DNA链真正起复制作用的酶,对温度敏感7/28/202123子链的准确延长DNA聚合酶:聚合酶活性5’→3’外切酶活性3’→5’

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