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时间:2020-03-26
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1、Chapter34DNA的复制和修复核酸代谢?Reolication&RepairofDNA(一)DNA是生物遗传的物质基础——遗传信息的载体遗传信息以密码的形式编码在DNA分子上,表现为特定的核苷酸排列顺序——三联体密码。DNARNAproteinreplicationtranscriptionreversetranscriptiontranslationreplication(二)中心法则Chapter31DNA的复制和修复一、基因信息的传递Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(一)DNA的存在形式染色体与质粒严紧控制质粒
2、又叫单拷贝质粒:每个细胞内只有一个或少数几个拷贝松弛控制质粒又叫多拷贝质粒:每个细胞内含有许多拷贝(20以上)DNA复制是指DNA的自我复制,也就是以亲代DNA为模板产生子代DNA的过程,最初称DNA的半保留复制(semiconservationreplication),进一步的研究发现半保留复制为半不连续复制(semidiscontinuousreplication)。Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(二)DNA的半保留复制DNA进行复制时,双螺旋结构解开而成为单链,用于合成新的互补链。子代细胞出现新的DNA双链,其中一
3、股单链是从亲代完整地接受过来的。另一股单链完全重新合成,且按碱基配对原则互补。1、DNA半保留复制的概念2、DNA半保留复制的证据氮同位素示踪试验和放射自显影法意义:保持DNA在代谢上的稳定性。DNA半保留复制的证据Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(三)DNA复制的起点(origin)和方式复制子(replicon):基因组能独立进行复制的单位叫复制子,每个复制子都含有控制复制起始的origin和终止复制的terminus。双向复制(bi-directional)、单向复制(unidirectional);复制叉(repl
4、icationfork)或生长点(growingpoint)多复制子(multi-replication)Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(四)DNA聚合反应和有关的酶这种能催化DNA合成的酶称DNA聚合酶(DNApolymerase)1.底物dNTP(dATP,dGTP,dCTP,dTTP)2.聚合酶DNA聚合酶(DNA依赖的DNA聚合酶)DNA--pol3.模板 单链的DNA母链4.引物 寡核苷酸引物(RNA)5.其他酶和蛋白质因子解链酶,解旋酶,单链结合蛋白,连接酶聚合机制DNA聚合酶具有5′至3′的聚合活性(5′→
5、3′)需要引物链的存在其次,DNA聚合酶具有核酸外切酶活性①3′→5′外切酶活性②5′→3′外切酶活性DAN聚合酶(DNApolymerase)分类大肠杆菌DNA聚合酶大肠杆菌有三种不同的DNA聚合酶,即DNA聚合酶I、II和III。DNA聚合酶I是一种多功能酶:(1)沿5’→3’方向延长DNA链(DNA聚合酶活力);(2)由3’端水解DNA链(3’→5’核酸外切酶活力);(3)由5’端水解DNA链(5’→3’核酸外切酶活力)等功能。——常用的工具酶复制准确性的保证:DNA复制过程中碱基的配对受到双重核对,即DNA聚合酶的选择作用和3’→5’
6、外切酶的校正作用。DNA聚合酶II:只具有3’→5’核酸外切酶活力DNA聚合酶III:真正起复制作用的酶,对温度敏感(看414页)Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(五)复制中的解链和DNA分子的拓扑学变化1、解螺旋酶领头链rep蛋白DnaB随从链解链酶ⅡChapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(五)复制中的解链和DNA分子的拓扑学变化2、DNA拓扑异构酶(解旋酶)3、引物酶和引发体引物酶RNA聚合酶DnaG(RNA聚合酶)引发体DnaA辨认复制启始点,再结合DnaB,DnaC及其他复制因子形成复合体Chapte
7、r31DNA的复制和修复二、DNA的复制(五)DNA连接酶(ligase)催化两段DNA之间的连接Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(六)DNA的半不连续复制日本学者冈崎等提出了DNA的不连续复制模型(1968)。1、DNA半不连续复制的概念当DNA复制时,一条链是连续的,另一条链是不连续的。前导链、滞后链;冈崎片段冈崎片段的合成需要一小段RNA为引物,“引物合成酶”2、DNA半不连续复制的过程(请看418页)Chapter31DNA的复制和修复二、DNA的复制(七)DNA复制的过程421页1、复制的起始:①DNA解成单链;
8、②引发体的生成2、复制的延长:①复制延长的生化过程;②复制的半不连续性和冈崎片段:前导链,滞后链冈崎片段:DNA复制过程中出现一些不连续片段,这些不连续片段只存在与
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