guan-3 动物细胞培养ppt课件.ppt

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1、第3章动物细胞与组织培养动物的细胞与组织培养定义：从动物体内取出组织或细胞，模拟机体内生理环境，在体外建立无菌、适当温度和一定营养条件下，使之生存和生长，并维持其结构和功能的方法。1动物细胞培养群体培养（massculture）：将含有一定数量细胞的悬液置于培养瓶中，让细胞贴壁生长，汇合（confluence）后形成均匀的单细胞层克隆培养（clonalculture）：培养高度稀释的细胞悬液，细胞贴壁生长，每一个细胞形成一个细胞集落，称为克隆。群体培养（左）和克隆培养（右）DefinitionsofTissueCultureTermscellculture-themain

2、tenanceandgrowingofdispersedcellsoutsidetheorganism.Secondaryculture－Cellstakenfromaprimarycultureandpassedordividedinvitro.Thesecellshavealimitednumberofdivisionsorpassages.tissueculture-themaintenanceofatissueorfragmentinawaythatmayallowdifferentiationandpreservationofthearchitectureand

3、/orfunctionmonolayer-singlelayerofcellsgrowingonasurfaceorganculture-maintenanceoftissues,wholeorpartsoforgansinawaythatmayallowdifferentiationandpreservationofthearchitectureand/orfunctionexplant-anexcisedfragmentofanorganwhichusuallyretainssomedegreeoftissuearchitecture原代培养（primarycultu

4、re）：即细胞或组织离开机体后的首次培养。primaryculture-startedfromcells,tissuesororganstakendirectlyfromananimal传代（passage）：培养的细胞生长到一定的密度后转移到新的容器中培养或需要更换到新的培养液称为传代或传代培养。subculture-thetransplantationofcellsfromoneculturetoanother(passaging)细胞系（cellline）：原代培养物经首次传代成功后即成细胞系，由原先存在于原代培养物中的细胞世系所组成。如果不能继续传代或传代数有限，

5、可称为有限细胞系。如果可以连续传代则称为连续细胞株原代培养细胞成功传代即为细胞系。cellline-arisesfromtheprimarycultureatthetimeofthefirstsubculture-"finite"lifespancontinuouscellline-acelllinewhichhasbeen"transformed"-"infinite"lifespan细胞株（cellstrain）：从培养细胞中筛选出的具有特定性质或标志的细胞群。克隆（clone）：亦称无性系。指由同一个祖先细胞通过有丝分裂产生的遗传性状一致的细胞群。2发展历史动物细胞

6、（组织）培养技术起源于19世纪所应用的某些胚胎学技术。动物细胞（组织）培养的奠基人是美国生物学家Harrison。在1907年采用盖玻片覆盖凹窝玻璃悬滴培养法将蛙胚的神经组织培养在淋巴液中，保持存活了几周时间，并观察到细胞突起的生长过程。Harrison--isolatedpiecesoffrogembryonictissueknowntogiverisetonervefibres-grewtheminfroglymph-observedoutgrowthofaxonsoverperiodofweeksin1907.法国学者Carrel功不可没。他1923年设计的卡氏培养

7、瓶，用鸡胚抽提液培养心肌组织取得成功并维持34年之久,特别注意到实验中的无菌操作。表三、实验室中常用的几种细胞系细胞系名称细胞类型来源3T3成纤维细胞小鼠HeLa宫颈癌上皮细胞HenriettaLacksBHK21成纤维细胞叙利亚仓鼠PtKl上皮细胞袋鼠L6成肌细胞大鼠PCI2嗜铬细胞大鼠SP2浆细胞小鼠SP2／0骨髓瘤浆细胞小鼠CHO卵巢细胞中国地鼠HenriettaLacks,Americanblack,diedofcancerofuterinecervixin19513应用领域生产单克隆抗体和疫苗。组织与器官再生、培养。