1涂片找抗酸杆菌操作规程01

《1涂片找抗酸杆菌操作规程01》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在应用文档-天天文库。

1、青海大学附属医院检验科编号：QDFYJY-WS001-1/0-2012章节：微生物实验室操作规程作业指导书标题：涂片找抗酸杆菌操作规程页码：第1页共3页涂片找抗酸杆菌操作规程1、检验目的检验样本中是否含有抗酸杆菌，为临床提供诊断依据。2、原理结核菌、麻疯杆菌、耻垢菌等抗酸性菌，因其菌体表面有一层类脂或脂质之皮膜而不易着色，但一经着色后，酸性酒精的作用亦是不容易把它脱色。利用这特性并以增强的染色液予染色，然后再以酸性酒精加以处理，使其脱色后再对比染色，此时抗酸性菌仍是固定着最初色素的颜色（红色），也就易于鉴别。3、标本要求（1）标本类型：病人的痰、穿

2、刺关节液、腹水、胸积液、组织、脑脊液、分泌物、尿液等。（2）标本采集：挑取痰标本中、脓样或可疑部分，于玻片正面均匀涂抹成卵圆形痰膜，自然干燥。染色前加热固定。4、容器和添加剂类型痰盒、尿杯、试管等。5、试剂（1）试剂名称：染色液。（2）产品型号：结核菌染色液（又名：抗酸染色液/TBStain）冷染法。（3）试剂生产厂家：珠海贝索生物技术有限公司。（4）包装规格：4X250ML。（5）试剂组成：主要成份试剂1：石碳酸复红液（1×250ml）　　　　碱性品红、笨酚试剂2：酸性酒精溶液（2×250ml）　　　　乙醇、盐酸试剂3：亚甲基蓝溶液（1×250m

3、l）　　　　亚甲蓝3第2页共3页6、仪器设备：OLYMPUSCX31奥林巴斯双目显微镜。7、操作步骤（1）涂片自然干燥后，经火焰固定，加石碳酸复红溶液盖满玻片，染色5分钟或更久（不需加温）。（2）水洗,(之后尽可能将水沥干）。加酸性酒精溶液盖满玻片，脱色1-2分钟（3）水洗（假如标本面还可以看到残存红色时，再加酸性酒精溶液脱掉红色为止）。（4）加亚甲基蓝溶液，染色30秒。（5）水洗干燥后，镜检。8、质量控制：参加我科质量管理组的质量控制活动。9、干扰和交叉反应麻风菌可能对检验结果产生影响。10、生物参考区间涂片未见抗酸杆菌。11、患者检验结果的可报

4、告区间涂片未见抗酸杆菌/涂片见细长、红色抗酸杆菌。12、结果判断抗酸性菌（结核菌）呈红色，其它细菌及细胞呈蓝色。结核菌通常为长1.3～3.5u，宽0.3～0.5u多少有点弯曲之杆菌，没有鞭毛和芽孢，属难染性菌，但抗酸性染色可使其显著被染。菌体有的成点状连着或成群也有，菌少的时候每2～3个菌呈V、Y、T字状的特有集结。13、临床意义：结核分枝杆菌不产生内毒素和外毒素，其毒力主要是在机体中细胞内、外生长与大量繁殖的能力，细菌成分与其代谢产物引起免疫反应（Ⅳ型）导致一系列组织学上的意义。3第3页共3页14、注意事项（1）脱色液用完后，可自制3％盐酸酒精溶

5、液作为脱色液。（2）每次试剂用完后，请迅速盖好，以免挥发。（3）抗酸染色直接用于痰标本时，可以适当增加标本涂片的厚度，以提高检出率。染厚涂片时，须掌握复染时间。如果背景过深，会影响镜检。（4）有时同一抗酸菌体上，红色的深浅亦有不同，观察时应予注意。（5）试剂盒储存时，尽量避免高、低温环境及阳光直射。（6）病理组织片的抗酸染色，建议使用热染法，但需要注意的是Carbolfuchsin的染色时间不能低于5分钟，如此即可得到较好的染色效果。（7）冬季室温过低时，染色时间要适当延长。（8）本品应有专业人员使用。（9）使用前应详细阅读使用说明书，在有效期内使

6、用，并做好个人卫生防护。（10）用后应按医院或环保部门要求处置弃物。15、生产许可证16、售后服务单位编写人审核人批准人批准日期3