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1、酒制对黄柏抗痛风作用的影响[摘要]目的：研究酒制对黄柏抗痛风作用的影响。方法：以小鼠血清尿酸水平和黄嘌呤氧化酶活性为指标，评价黄柏生品和酒制品抗痛风作用。结果：黄柏生品低剂量和高剂量均可降低高尿酸血症小鼠血清尿酸水平、抑制小鼠肝脏黄嘌呤氧化酶活性，具有抗痛风作用，而高剂量对正常动物血清尿酸水平仅有一定降低趋势，但无显著性差异。而酒制品的低剂量和高剂量可升高正常动物血清尿酸水平，可加速尿酸进入软组织形成结晶引发痛风。结论：酒制抑制黄柏抗痛风作用甚至引发痛风。[关键词]黄柏；酒制；抗痛风黄柏性味苦寒，归下焦肾、膀胱经，是清热燥湿代表中药，在中医
2、临床上常以其为君药组成的方剂如二妙、三妙、四妙系列方、黄柏胶囊等治疗痛风取得了明显的效果[]。本研究选择抗痛风为切入点，以血清尿酸水平和黄嘌呤氧化酶活性为指标，研究酒制对黄柏抗痛风作用的影响。1材料1.1动物昆明种小鼠，雄性，体重(28±2）g,河南中医学院实验室提供。使用前在实验室饲养1周以适应动物室条件。在整个实验过程中自由饮水和供给食物。1.2仪器和试剂UV-3000型分光光度计(日本岛津);尿酸、别嘌呤醇均为Sigma产品;氧嗪酸钾盐(potassiumoxonate)为AldrichChemicalCompany产品。其他均为国产
3、分析纯试剂。1.3 药品 黄柏药材来自河南中医学院实验室,经河南中医学院张振凌教授鉴定为芸香科植物黄柏PhellodendronamurenseRupr·的干燥树皮,产地为吉林省。酒制品的制备按2010年版《中国药典》自行炮制。取黄柏生品、酒制品饮片500g,加水4000mL煎煮2次,合并煎出液,浓缩,减压干燥,得率分别为16.11%和16.09%。黄柏生品和酒制品的提取物、阳性药别嘌呤醇分别用0.8%羟甲基纤维素钠(CMC-Na)配制适当浓度的混悬液,备用。2方法2.1高尿酸血症模型的建立 参考文献方法,选用氧嗪酸钾盐为尿酸酶抑制剂,抑制
4、尿酸酶,增高血清尿酸水平,造成小鼠高尿酸血症模型。采用磷钼酸还原法测定血清尿酸水平。2.2黄嘌呤氧化酶活性的测定 在冰台上快速取出小鼠肝脏,称重后加入5倍体积的4℃80mmol.L磷酸缓冲液(pH7.4),在冰浴条件下中充分匀浆,获得肝匀浆液,并在4℃条件下以3000r.min的速度离心10min,去除上层脂质,取出上清液,继之在4℃条件下按1万r.min速度离心60min。取上清液按照文献方法测定小鼠肝脏线粒体黄嘌呤氧化酶活性。采用Lowry方法测定上清液中蛋白含量。2.3实验分组和给药 雄性小鼠随机进行分组,每组10只。正常实验分为6组
5、即生理盐水组、黄柏生品、酒制品低、高剂量组及阳性对照药别嘌呤醇组。模型实验分为7组,即生理盐水组、高尿酸血症空白组、以及黄柏生品、酒制品低、高剂量组及阳性对照药别嘌呤醇组。开始时生理盐水组和高尿酸血症空白组每天均按25mL.kg剂量ig生理盐水,连续3d,高尿酸血症空白组在取血样前2h用氧嗪酸钾盐按300mg.kg剂量ip小鼠。正常实验和模型实验中各药物组每天ig给药1次,连续3d,黄柏生品、酒制品低、高剂量分别为50,500mg.kg,别嘌呤醇剂量为10mg.kg,在最后1次给药前1h,模型组同上ip氧嗪酸钾盐,1h后从小鼠眼眶后静脉丛进
6、行采血,血样分别置于1.5mL的离心管中,在室温下自然凝血1h,在2500r.min离心5min。每份血样取200μL用于尿酸水平测定。2·4 统计与处理 结果以-x±s表示,进行方差分析检验。3 结果3·1 黄柏生品和盐制品的提取物对正常小鼠血清尿酸的影响 结果见表1。与生理盐水组比较,黄柏生品、盐制品仅高剂量组在一定程度上降低正常小鼠血清尿酸水平,但未有显著性影响。黄柏各剂量组平行比较,盐制品略弱于黄柏生品。而别嘌呤醇组可显著地降低正常小鼠血清尿酸水平。表1 黄柏生品、酒制品提取物对正常小鼠血清尿酸水平的影响(±s,n=10)组别剂量/
7、mg.kg血清尿酸水平/nmol.生理盐水组-219.0±8.33黄柏生品250214.9±6.5500192.9±7.7黄柏酒制品组250211.9±10.71500197.6±5.95别嘌呤醇10146.4±10.12
