发酵工程-空气净化ppt课件.ppt

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1、1)发酵罐的灭菌(在夹套中)关好空气阀门,蒸汽上进下出,冲蒸气,压力大于2kg/cm2(120℃),最好是4~5kg/cm2(160℃)。当罐内温度>80℃,进蒸汽口(蒸气阀)关掉,出蒸汽口(排气阀)关小。打开空气阀门,蒸汽直接进罐,121℃,20~30min。从80℃~100℃上升很快,大于100℃后温度上升很慢,到118℃时就开始计时,到计时25min时立即关掉蒸汽阀。关掉蒸汽阀后通入无菌空气,使罐内一直保持正压(高于大气压,空气不会倒灌入罐内)。(在夹套中)加自来水冷却,从下向上,使温度尽快降到55℃左右,到37~38℃时关掉水,也有缓冲性。

2、因为有缓冲性,蒸汽会冲到121℃。在80℃以上冲入蒸汽不容易产生冷凝水,罐内体积不会增加很大,培养基不会被稀释很大。过程小型罐50L~7吨用夹套系统冷却;大型罐7吨以上,用冷却管(盘肠、列管系统)。2)发酵罐的管路和死角的消除(1)尽量减少管路单罐多罐发酵罐的出口越少越好,出料口和进气管可以合并,接种管、消泡管、补料管可以合并。排气管不能合并,易引起交叉污染。出料前后都要消毒,用活(流动)蒸气消毒;出料管不能合并;(2)消灭死角管道转弯有弧度放料管、取料管的阀腔处装小阀3)发酵罐的管道布置保证蒸气在管道中畅通,有排气口(小阀),接种管、中间补料管、

3、放料管都要有排气口(小阀);避免冷凝水排入已灭菌的罐体或空气,加止逆阀(单向阀);灭菌后的管道用无菌空气保压;蒸气总管道要有分气缸、排气阀、减压阀、安全阀;相邻罐不联通连续灭菌也叫连消培养基采用连续灭菌时,需在培养基进入发酵罐前,直接用蒸汽进行空罐灭菌,用无菌空气保压,待培养基流入罐后,开始冷却。灭菌时可采用各种加热器。培养基的冷却方式有喷淋冷却式、真空冷却式、薄板换热器式几种方式,其过程均包括加热、维持和冷却。连续灭菌的流程:培养基配料冷却器加热塔配料罐无菌培养基2、连续灭菌喷淋冷却优点是能一次冷却到发酵温度。培养基冷却方式比较:真空冷却只能冷却

4、到一定温度,需在发酵罐中继续冷却,但它可以减少冷却用水,占地面积少。板式换热器效率高,且利用冷培养液作冷却剂,既能冷却了热培养基,又预热了冷培养液,节约用水和蒸汽。连续灭菌采用连消塔时,可在20~30s达到预定灭菌温度,由维持罐来保持必需的杀菌时间。采用喷射杀菌设备,蒸汽直接喷入生培养液,温度几乎立即上升到预定杀菌温度,由保温段管子的长度来保证必要的杀菌时间。采用板式换热器,可在20s内达到杀菌温度,经保温保持必要的杀菌时间,然后再板式热交换器另一段20s内冷却到发酵温度。第四章无菌空气的制备(一)空气净化的方法一般可按10-3的染菌概率,即在10

5、00次培养过程中,只允许一次是由于空气灭菌不彻底而造成染菌,致使培养过程失败。热灭菌法辐射灭菌静电除菌介质过滤除菌法空气净化的方法大致有以下几种:空气灭菌的目的----除去空气中的水雾、油雾、尘埃,同时也除去了空气中的微生物1.热灭菌法它与培养基的加热灭菌相比,虽都是加热法把微生物杀死,但两者的本质是有区别的。鉴于空气在进入培养系统之前,一般均需用压缩机压缩,提高压力,所以,空气热灭菌时所需的温度,就不必用蒸汽或其他载热体加热,而可直接利用空气压缩时的温度升高来实现。空气经压缩后温度可升到200℃以上,保持一定时间后,便可实现干热杀菌。利用空气压缩

6、时所产生的热量进行灭菌的原理对制备大量无菌空气具有特别重要的意义。2、辐射灭菌利用超声波、紫外线、X射线、α射线、β射线γ射线或放射性物质产生的高能粒子破坏蛋白质等生物活性物质进行灭菌,以紫外线最常用。仅适用于表面灭菌和无菌室、培养室等空间的灭菌。3.静电除菌静电除菌时是利用静电引力来吸附带电粒子而达到除尘灭菌的目的。对于一些直径很小的微粒,它所带的电荷很小,当产生的引力等于或小于微粒布朗扩散运动的动量时,则微粒就不能被吸附而沉降,所以静电除尘灭菌对很小的微粒效率较低。悬浮于空气中的微生物,其孢子大多数带有不同的电荷,没有带电荷的微粒进入高压静电场

7、时都会被电离成带电颗粒。过滤除菌法是让含菌空气通过过滤介质,以阻截空气中所含微生物,而取得无菌空气的方法。并有足够的压力和适宜的温度以供好氧培养过程之用。该法广泛应用,是获得大量无菌空气的常规方法,在生产中使用最多。4.介质过滤除菌法第二节空气的过滤除菌原理和过滤介质一、空气的过滤除菌原理布朗扩散截留作用拦截截留作用惯性撞击截留作用重力沉降作用静电吸引作用在过滤除菌中,有时很难分辨上述各种机理各自所作贡献的大小。一般认为惯性撞击截留、拦截截留和布朗运动截留的作用较大,而重力和静电引力的作用则很小。二、空气过滤除菌的介质和过滤器用于空气过滤的过滤介质

8、有纤维状物或颗粒状物、过滤纸、微孔滤膜等各种类型。1、纤维状或颗粒状过滤介质棉花----常用的过滤介质,通常使用脱脂棉玻璃

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