第07章临床专用自动生化分析仪分析技术ppt课件.ppt

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1、第七章 临床专用自动生化分析仪分析技术广州医学院医学检验系刘忠民全国高等医药院校医学检验专业规划教材临床生物化学检验(第二版)教学目标与要求掌握:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪分析技术的基本原理和方法。熟悉:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的结构组成特点,仪器的维护保养,质量控制和临床应用。了解:浊度、电解质、血气和电泳自动分析仪的分类。2目录浊度自动化分析技术1电解质自动化分析技术2血气自动化分析技术3电泳自动化分析技术4小结与展望5返回总目录3第一节 浊度自动化分析技术4前言浊度分析通过检测溶液浊度,对物质含量进行分析的方法。临床

2、上多用于特定蛋白的分析。特定蛋白在机体内具有某种生理功能,疾病状态时又有着特定的病理生理意义的蛋白质,临床上常被称为特定蛋白(specialprotein)。5一、浊度分析的基本原理和方法6(一)浊度分析的基础理论1.胶体溶液粒子对光具有反射、折射、散射和吸收等作用。2.光透射理论朗伯-比尔(Lambert-Beer)定律:3.光散射理论雷莱(Rayleigh)公式:7该公式来自气溶胶悬浮微粒,用于溶液时需进行校正。当使用高强度光源(如激光)时,液相悬浮颗粒与非偏振光源的散射作用公式为:公式可见,散射光强度与颗粒的浓度和分子量有关。8雷莱公式

3、与修正公式雷莱公式仅适合直径<1/10入射光波长的小颗粒Debye修正公式适合于颗粒直径略小于入射光波长的溶液Mie修正公式适合于颗粒直径等于或大于入射光波长的溶液94.免疫浊度分析在一定条件下,可溶性抗原与抗体在液相中特异结合,形成有一定大小的抗原-抗体免疫复合物颗粒,使反应液出现浊度;当光线通过介质中的复合物颗粒时,可形成光的吸收、透射、散射和折射;通过测量透射光或散射光信号强弱,从而推算出被测物的量。10(二)浊度分析的基本方法浊度分析方法的分类根据检测器的位置及其接收光信号的性质分:透射免疫浊度法(turbidimetryimmuno

4、assay)散射免疫浊度法(nephelometryimmunoassay)根据复合物形成速度和测定方式分:终点浊度法速率浊度法根据浊度形成的原理分:沉淀反应免疫浊度法:灵敏度低胶乳凝集比浊(或粒子强化免疫浊度法):灵敏度高111.透射免疫浊度法指在光源的光路0o角方向上测量透射光强度,并研究其与被检测溶液微粒浓度关系的方法。2.散射免疫浊度法指在光路的5o~90o角的方向上测量散射光强度,并研究其与被测溶液中微粒浓度关系的方法。12免疫浊度分析法测定光路图131.终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法为终点测定法。2.速率散射

5、浊度法所谓速率即指在抗原抗体结合反应过程中,单位时间内两者结合成复合物的量。速率散射浊度法是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量,该峰值的高低与抗原的量成正比。14粒子强化免疫浊度法为一种带载体的免疫浊度法,其敏感度较高。该方法选择一种大小适中、均匀一致的胶乳颗粒,吸附或交联抗体;当遇到相应抗原时,则发生聚集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内,光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时,透过光减少,光减少的程度与胶乳凝集量成正比。15二、浊度分析仪的分类和基本结构16(一)浊度分析仪分类1.分光光度仪采用终点法作免疫浊度分析的测定仪。2.自动

6、生化分析仪目前较流行的大型多通道自动生化分析仪多专门编有或可自编透射浊度分析程序。3.散射浊度分析仪应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪。17(二)自动散射浊度分析仪的结构主要由分析系统、计算机系统组成。分析系统用于加样、稀释、保温和测试等;包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、卡片阅读器以及软盘驱动器等;计算机系统用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储存测试结果;包括计算机主机、CRT显示屏和键盘等。18散射浊度分析仪光路示意图19三、浊度分析仪的保养20常规保养1.日保养①关机前冲

7、洗管道,以防止管道阻塞。②开机前应检查注射器,防止漏液。③检查稀释液、缓冲液及抗体试剂中液体的体积。④检查废液桶中的废液是否已经装满。⑤在做标本之前必须对所有光路进行光路校正。2.周保养①更换流动比色杯和小磁棒。②用纱布蘸10%漂白溶液清洁探针的外部。③检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况。21常规保养3.月保养①更换注射器插杆顶端;②空气过滤网冲洗;③疏通标本和抗体探针的内部。4.半年保养①更换钳制阀上管道和泵周管道;②给机械传动部分的螺丝上润滑油。22四、浊度分析的质量控制23(一)抗原过剩校正免疫浊度分析的基本要求:始终保持反应

8、体系中抗体适量过剩。抗原过剩的检测方法:①连续监测抗原抗体反应曲线,当抗原过剩时,反应曲线呈现异常。②反应体系中追加抗体,如果浊度继续增大则提示抗原过剩。③待测标本

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