临床专用生化分析仪分析技术.ppt

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1、第七章临床专用生化分析仪分析技术教学要求和目标掌握各分析技术的基本原理和分析方法熟悉各分析技术仪的结构组成特点，仪器的维护保养，质量控制和临床应用了解各分析技术仪的分类第一节浊度自动化分析技术一、浊度分析的基本原理在一定条件下，可溶性抗原与抗体在液相中特异结合，形成有一定大小的抗原颗粒，使反应液出现浊度当光线通过介质中的复合物颗粒时吸收、透射、散射和折射通过测量透射光或散射光信号强弱被测物的量。浊度分析方法的分类检测器的位置及接收光信号的性质分透射免疫浊度法（turbidimetryimmunoassay散射免疫浊度法（nep

2、helometryimmunoassay测定方式分：终点浊度法与速率浊度法浊度形成原理分：沉淀反应浊度法与胶乳凝集比浊（粒子增强免疫浊度法）终点散射浊度法检测反应终点与起始点之间信号变化的方法速率散射浊度法速率是指在单位时间内抗原抗体结合反应形成复合物的量。是在抗原与抗体反应的最高峰测定其复合物形成的量，该峰值的高低与抗原的量成正比。粒子增强免疫浊度法选择大小适中、均匀一致的胶乳颗粒吸附或交联抗体；当遇到相应抗原时，则发生聚集。单个胶乳颗粒在入射光波长之内，光线可透过。当两个或更多胶乳颗粒凝聚时，透过光减少，光减少的程度与胶乳

3、凝集量成正比。灵敏感度较高。二、浊度分析仪的分类和基本结构自动生化分析仪散射浊度分析仪应用较为普遍的有固定时间散射分析仪、速率散射分析仪和双光路自动免疫浊度分析仪自动散射浊度分析仪的组成分析系统：用于加样、稀释、保温和测试等。包括散射测浊仪、加液系统、试剂转盘、样品转盘、卡片阅读器等计算机系统：用于输入病人数据、选择程序菜单、计算参考曲线和储存测试结果散射浊度分析仪光路示意图三、浊度分析仪的保养常规保养日保养①关机前冲洗管道，以防止管道阻塞②开机前应检查注射器，防止漏液③检查D、B、A、W液面高度④光路校正周保养①更换流动比色

4、杯和小磁棒②清洁探针的外部③检查蠕动泵和钳制阀控制着管路中液体的流动情况月保养①更换注射器插杆顶端②空气过滤网冲洗③疏通标本和抗体探针的内部半年保养①更换管道②机械润滑四、浊度分析的质量控制（一）抗原过剩校正检测方法：①连续监测抗原抗体反应曲线，呈现异常②追加抗体，浊度继续增大③标本两种稀释度测定，浓度高的浊度反而低（二）减少伪浊度伪浊度：除待测抗原抗体复合物产生的浊度外，其它可引起透射光或散射光变化的浊度都称为伪浊度减少伪浊度的方法：Ø采用新鲜、合格标本Ø保持比色杯和稀释杯清洁Ø使用合格的抗体试剂Ø严格控制增浊剂的浓度（三）

5、选择合适的入射光波长入射光波长的选择原则：除了抗原抗体免疫复合物外，反应体系中的其他成分对入射光的干扰应为最小，因为其他成分吸收了部分入射光，透射比浊法测定结果将使抗原浓度偏高，而散射比浊法测定将使抗原浓度偏低。（四）仪器校正选择合适的校准品校准曲线的绘制校准曲线的形状取决于抗血清和促聚剂的浓度的选择，也与免疫浊度法类型、校正方法及校准品的质量有关。多推荐5点或6点定标。适当的数学方法进行曲线拟合五、特定蛋白浊度分析的临床应用特定蛋白临床常规项目免疫功能监测免疫球蛋白：IgG、IgM、IgA、C3、C4临床意义：IgG、Ig

6、A、IgM检测有助于了解机体抗感染能力，有助于疾病的正确诊断和有效治疗。在免疫复合物疾病中，C3、C4检测可以了解其消耗程度。适应症：①免疫力低，反复感染病人；②自身免疫性疾病；②多发性骨髓瘤；④慢性肝病；⑤非何杰金氏淋巴瘤；⑥白血病；⑦良性单克隆免疫球蛋白病；⑧先天性或获得性低免疫球蛋白血症；⑨对白、球蛋白比例异常者的随访⑩术后感染、移植排斥反应第二节电解质自动化分析技术一、电解质分析的原理和方法离子选择性电极（ionselectiveelectrodeelectrode，ISE）是一类用特殊敏感膜制成，对溶液中某种特定离子

7、具有选择性响应的电化学传感器。常用于测量离子的活度或浓度。ISE基本结构通常由电极管、内电极、电极内充溶液和电极膜（或称敏感膜）四个部分组成。电极电位产生基于膜材料与溶液界面发生的离子交换反应当电极置于溶液中时，由于离子交换和扩散作用，改变了二相中原有的电荷分布，因而形成双电层，其间产生一定的电位差即膜电位ISE的电位与溶液中特定离子活度的对数呈线性关系，即符合Nernst方程3.电极电位测量ISE的EISE值不能直接测定必须将ISE与参比电极共同浸入待测样品中组成一个原电池，通过测量E电池来测定EISE值。在一定条件下，原电

8、池的电动势与被测离子活度的对数呈线性关系。（二）ISE电位分析方法Ø标准比较法（或直读法）：指在pH计或离子计上直接读出数值的方法，适用于少量样本的分析Ø标准曲线法：适用于大批量的试样分析Ø标准加入法：当待测溶液组分较复杂，很难控制相同的离子强度时，选用标准加入法（二）ISE