金黄色葡萄球菌检验与相关知识.pdf

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1、金黄色葡萄球菌检验与计数方法GB4789.10-2010李天添目录金黄色葡萄球菌的危害及致病性细菌学及生化特性分布及流行病学金黄色葡萄球菌的检验与计数方法概述v葡萄球菌属微球菌科，本属有19个菌种，从人体上可检出12个种。v葡萄球菌属主要与皮肤腺体和温血动物的粘膜相关系，有些种是人及动物的条件致病菌。危害及致病性v金黄色葡萄球菌为条件致病菌，菌株致病力的强弱主要取决于其产生的毒素和侵袭性酶：§溶血素：外毒素，分α、β、γ、δ四种，能损伤血小板，破坏溶酶体，引起肌体局部缺血和坏死；§杀白细胞素：可破坏人的白细胞和巨噬细胞；§血浆

2、凝固酶：当金黄色葡萄球菌侵入人体时，该酶使血液或血浆中的纤维蛋白沉积于菌体表面或凝固，阻碍吞噬细胞的吞噬作用。葡萄球菌形成的感染易局部化脓与此酶有关；§脱氧核糖核酸酶：金黄色葡萄球菌产生的脱氧核糖核酸酶能耐受高温，可用来作为依据鉴定金黄色葡萄球菌；§肠毒素：金黄色葡萄球菌能产生数种引起急性胃肠炎的蛋白质性肠毒素，分为A、B、C、D、E五种。感染金黄色葡萄球菌是人类化脓感染中最常见的病原菌，临床表现多种多样，可引起局部化脓感染，也可引起肺炎、伪膜性肠炎、心包炎等，甚至败血症、脓毒症等全身感染。食物中毒v葡萄球菌性食物中毒是葡萄球

3、菌肠毒素所引起的疾病，是最常见的细菌性食物中毒之一§症状：急性胃肠炎症状，恶心、呕吐、腹痛、头痛、腹泻等§程度：轻微到严重(少数)§死亡率：<0.02%§中毒剂量：>1微克肠毒素目录金黄色葡萄球菌的危害及致病性细菌学及生化特性分布及流行病学金黄色葡萄球菌的检验与计数方法形态与染色v呈球形，直径0.4μm~1.2μmv繁殖时堆积成为葡萄串状排列v革兰氏阳性菌v需氧、兼性厌氧v无芽胞，无动力形态与染色形态与染色金黄色葡萄球菌的基本特性v营养要求低，在普通培养基中生长良好v需氧或兼性厌氧v能在pH4.2-9.3之间生长(最适pH7.

4、4)v耐盐性强（10%~15%）v10~45℃可生长(最适温度37℃)v对干燥有一定耐受性v对热敏感金黄色葡萄球菌生化特性v发酵糖或醇时产酸不产气v能产生溶血素v能产生血浆凝固酶§鉴别葡萄球菌有无致病性的重要指标v能产生肠毒素§与食物中毒密切相关§在温度条件适宜时，经8-10小时即可相当数量的肠毒素v能产生蛋白类、多糖类抗原葡萄球菌肠毒素v食品引发疾病的最主要原因之一v能在没有微生物的情况下存在v单链蛋白质v不受胰蛋白酶的影响v经煮沸30～40分钟后仍不破坏v几乎是细菌蛋白质类毒素中唯一耐热的v根据肠毒素的血清型，可分A、B、

5、C（C1、C2、C3）、D、E等五个型。A型肠毒素引起的食物中毒较多，约占50%左右。其他依次为D、C、B和E型。也有A＋D、A＋B、A＋C、B＋C等。目录金黄色葡萄球菌的危害及致病性细菌学及生化特性分布及流行病学金黄色葡萄球菌的检验与计数方法金黄色葡萄球菌分布—环境v环境中无处不在§人§动物§空气§水§灰尘§衣物§器具§粪便金黄色葡萄球菌分布—人类30%以上的普通人群长期携带30%金黄色葡萄球菌鼻腔、皮肤分布喉咙、会阴皮肤侵入（痤疮、睑腺炎）易感染伤口处、呼吸道感染金黄色葡萄球菌分布—常见动物v鸡：存在于鸡的皮肤v奶牛：健康

6、牛乳房与奶头，大量存在于乳腺炎中v猪：扁桃体和皮肤流行病学v金黄色葡萄球菌肠毒素是个世界性卫生问题，在美国由金黄色葡萄球菌肠毒素引起的食物中毒占整个细菌性食物中毒的33%，加拿大则更多，占45%，我国每年发生的此类中毒事件也非常多。流行病学v季节分布，多见于春夏季；v中毒食品种类多，如奶、肉、蛋、鱼及其制品。此外，剩饭、油煎蛋、糯米糕及凉粉等引起的中毒事件也有报道。上呼吸道感染患者鼻腔带菌率83%，所以人畜化脓性感染部位常成为污染源。流行病学v肠毒素形成条件：§存放温度，在37°C内，温度越高，产毒时间越短；§存放地点，通风不

7、良氧分压低易形成肠毒素；§食物种类，含蛋白质丰富，水分多，同时含一定量淀粉的食物，肠毒素易生成。目录金黄色葡萄球菌的危害及致病性细菌学及生化特性分布及流行病学金黄色葡萄球菌的检验与计数方法金黄色葡萄球菌的检验与计数方法v检验方法（定性）GB4789.10第一法v定量方法§平板法GB4789.10-2010第二法（GB4789.37-2008第一法）§MPN法GB4789.10-2010第三法（GB4789.37-2008第二法）§3M测试平板法（GB4789.37-2008第三法）金黄色葡萄球菌的检验与计数方法v检验方法（定性

8、）GB4789.10第一法v定量方法§平板法GB4789.10-2010第二法（GB4789.37-2008第一法）§MPN法GB4789.10-2010第三法（GB4789.37-2008第二法）§3M测试平板法（GB4789.37-2008第三法）金黄色葡萄球菌平板法详解