金黄色葡萄球菌检验

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1、【GB/T4789.10—1994】金黄色葡萄球菌检验1　主题内容与适用范围中国药品保健食品网www.chndrug.com　　本标准规定了食品中金黄色葡萄球菌的检验方法。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　本标准适用于食品和食物中毒样品中金黄色葡萄球菌的检验。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　2　引用标准中国药品保健食品网www.chndrug.com　　GB 4789.28　食品卫生微生物学检验染色法、培养基和试剂中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3　设备和材料中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.1　显

2、微镜。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.2　温箱：36±1℃。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.3　离心机。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.4　灭菌吸管：1mL、10mL。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.5　灭菌试管。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.6　灭菌平皿。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.7　均质器。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.8　载玻片。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.9　L型涂布

3、棒。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.10　酒精灯。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　3.11　接种环。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4　培养基和试剂中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.1　胰酪陈大豆肉汤：按GB 4789.28中4.59规定。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.2　7.5%氯化钠肉汤：按GB 4789.28中4.61规定。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.3　血琼脂平板：按GB 4789.28中4.6规定。中国药品保健食品网www.chn

4、drug.com　　4.4　Baird－Prker琼脂平板：按GB 4789.28中4.60规定。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.5　肉浸液肉汤：按GB 4789.28中4.1规定。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.6　灭菌盐水。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　4.7　兔血浆：按GB 4789.28中4.63规定。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　5　检验程序中国药品保健食品网www.chndrug.com　　金黄色葡萄球菌检验程序如下：中国药品保健食品网www.chndrug.com　　（图略

5、）中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6　操作步骤中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1　增菌培养法中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1.1　检样处理中国药品保健食品网www.chndrug.com　　称取25g固体样品；吸取25mL液体样品，加入225mL灭菌生理盐水，固体样品研磨或置均质器中制成混悬液。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1.2　增菌及分离培养中国药品保健食品网www.chndrug.com　　吸取5mL上述混悬液，接种于7.5%氯化钠肉汤或胰酪陈大豆肉汤50mL培养基内，置36±

6、1℃温箱培养24h，转种血平板和Baird－Parker平板，36±1℃培养24h，挑取金黄色葡萄球菌菌落进行革兰氏染色镜检及血浆凝固酶试验。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1.3　形态中国药品保健食品网www.chndrug.com　　本菌为革兰氏阳性球菌，排列是葡萄球状，无芽胞，无荚膜，致病性葡萄球菌菌体较小，直径约为0.5～1μm。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1.4　在肉汤中呈混浊生长，在胰酪陈大豆肉汤内有时液体澄清，菌量多时呈混浊生长，血平板上菌落呈金黄色，也有时为白色，大而突起、圆形、不透明、表面光滑，周围有溶血圈。

7、在Baird－Parker平板上为圆形、光滑凸起、湿润、直径为2～3mm，颜色呈灰色到黑色，边缘为淡色，周围为一混浊带，在其外层有一透明圈。用接种针接触菌落似有奶油树胶的硬度，偶然会遇到非脂肪溶解的类似菌落；但无混浊带及透明圈。长期保存的冷冻或干燥食品中所分离的菌落比典型菌落所产生的黑色较淡些，外观可能粗糙并干燥。中国药品保健食品网www.chndrug.com　　6.1.5　血浆凝固酶试验中国药品保健食品网www.chndrug.com　　吸取1∶4新鲜兔血浆0.5mL，放入小试管中，再加