液相色谱仪操作流程.docx

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1、岛津液相色谱仪操作流程（LC16）单泵4泵头1.准备流动相1.1、甲醇、高纯水（或二次蒸馏水），分别用有机系和水系0.45vm滤膜抽滤，超声波15-20min，更换流动相。或者根据实验方法选择流动相。1.2、注意：切勿让水系滤膜接触到有机相，会发生溶解。2.根据方法文件选择换上合适的色谱柱。（注意色谱柱的方向）2.开机及排气泡2.1、接通电源，依次开启泵、检测器、Lcsolution工作站。2.2排气泡2.21、通过软件设置冲洗条件。开启LC系统后，启动【LC实时分析】工作站后，确保分析仪器的所有单元（泵、柱温箱和检测器）都已连至系统控制器。确保所有单元

2、上都没有显示任何错误消息。打开spd新建方法文件常规低压梯度洗脱根据需要设置需要冲洗的泵头（例：只冲洗泵A，设等度洗脱即可。同时冲洗泵A、泵B，则选择低压梯度洗脱，泵B设50%。）下载。2.22、然后将排液阀旋钮逆时针旋转180°，以打开排液阀，按“Purge”键运行，开始冲洗。等待仪器，自动结束冲洗程序。关闭排液阀。3.设置仪器参数：3.1【新建方法文件】：根据实验方法，可以在其中输入分析条件，流速、波长、流动相配比（如果是单泵单泵头，需手动配制流动相。多泵头可根据流动相配比设置百分比）、柱温（若实验方法未注明则是室温，柱温箱可设25摄氏度，若室内有温

3、控可关闭柱温箱选项）、LC停止时间（未知保留时间表样，或复杂成分样品，选最大时间，或出现目标峰后基线平稳，无杂峰的最小时间）。3.2设置好实验条件后，单击“下载”将设置传输到仪器，使用新名称保存方法文件。3.3设置进样信息：确保显示【就绪】，且【色谱图视图】中的基线稳定后（一般约需15～30分钟）。单击【LC实时分析】窗口助手栏上的“单次运行”图标，出现“单次运行”屏幕，设置样品名、样品ID、数据文件、数据描述、进样体积等，然后单击【确定】。3.4检测器调零：点击“检测器A零点”图标，使检测器数值调零。等基线、压力稳定后可进样。3.5进样：3.51吸取不

4、少于60μl的样品（定量阀为25vl,进样体积为定量阀体积的2-3倍），放在进样口，向左打开进样阀，将样品全部打入进样口，向右打下进样阀，系统即自动开始采集数据。单次分析开始，并且【LC实时分析】窗口中的状态从【就绪】变为【运行】。3.52当达到【仪器参数视图】中指定的检测器的【结束时间】时，自动终止数据采集。3.53如设定的【结束时间】要修改，可以单击【采集】助手栏中的【停止】图标，也可以在【数据采集】菜单的【更改分析时间】项目中，在数据采集过程更改结束时间。一旦开始数据采集，【仪器参数视图】设置变为只读，并且不能在【仪器参数视图】中更改结束时间。4.

5、数据处理4.1单击“Lcsolution16c”中的“再解析”，“LC再解析”开始。4.12选择【文件】菜单中的“选择项目文件夹”，然后选择预测定的数据文件，数据文件即打开。4.13单击助手栏中的【向导】图标，单击“program”点击【下一步】，设置正确的积分参数。4.14记录要识别的峰的保留时间，单击【下一步】输入所需峰的详细内容，然后单击【完成】。单击化合物表右上角【视图】按钮，查看【结果】。4.15单击【LC数据】助手栏中的【应用到方法】图标，出现屏幕，提示指定方法文件名。命名方法文件并单击【保存】。5.打印报告：在【LC数据分析】点击左下角的【

6、报告格式】出现“操作人”名，选定“操作人”双击。然后点击左下角【数据】，从【数据】中拖动【数据文件】进行打印报告。6.清洗和关机6.1分析完毕后，设置冲洗条件，再用适当经滤过和脱气的溶剂清洗色谱系统，一般用先用25～30%甲醇冲洗，然后用纯甲醇冲洗。25～30%甲醇一般冲洗15～30分钟，纯甲醇冲洗不得少于30分钟，特殊情况应延长冲洗时间。先关色谱工作站和检测器最后关闭泵电源。6.2关断电源，作好使用登记，内容包括日期，检品，仪器完好状态等。