安捷伦1260液相色谱仪操作流程.doc

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1、安捷伦1260液相色谱仪操作流程及注意事项1、配制流动相，水相置于棕色玻璃瓶中，有机相置于相应无色玻璃瓶中。水相和有机相必须过滤，滤膜选用0.45有机系滤膜（尼龙）。注意：过夜的流动相必须重新过滤。2、流动相过滤后，置超声仪中超声20min。3、将已超声的流动相轻轻换上，动作不要太剧烈，会产生气泡，注意不要把有机相和水相换反了（A是有机相，B是水相）。4、将色谱柱接上，注意：流动相的流动方向必须和色谱柱上的箭头方向一致。5、打开计算机电源、显示器开关，并输入密码。6、依次从上往下打开液相色谱仪上的所有开关。7、打开液相色谱在线工作站（online），输入密

2、码。8、打开的液相工作站上分为四个小部分，依次为进样器、泵、柱温箱及检测器。在第二个部分设置流动相的体积及溶剂瓶的总体积。9、脱气：旋开purge阀开关，右击泵部分，选择“method”，选择B相100%，流速1ml/min，选择确定；右击泵部分，选择“control”，选择pump“on”，10秒后，调节流速为3ml/min，10秒后，调节流速5ml/min，开始水相脱气3min，水相脱气结束后，将流速按照5ml/min-3ml/min-1ml/min的流程往下调。然后开始有机相脱气，步骤同上，注意流速不可一下子从1ml/min调到5ml/min，需慢慢

3、调节。流动相脱气结束后，旋紧purge阀开关。10、建立样品的色谱方法：设置进样体积，选择洗针进样，注明洗针位置；设置流动相比例、流速及梯度洗脱条件，序列进样时设置样品运行时间和后运行时间；打开柱温箱，设置柱温；打开紫外检测灯，设置检测波长。全部设置好后，保存方法，不要覆盖别人的方法。11、谱图保存路径的设置：View—preferences—datapath（第二个选项）—remove旧的文件夹，add自己的文件夹。再打开Sequence—Sequenceparameter—选择Datapath为自己的文件夹即可。12、设置进样序列，注意序列表的填写。序

4、列进样后，如想关闭泵及检测器，请点击Sequence—Sequenceparameter选择shutdown—standby。13、将样品按顺序摆放在自动进样器的托盘上。14、注意泵压力是否正常，色谱柱是否漏液，如一切正常，关上柱温箱的盖子。待基线平稳后，点击Sequence进样。15、进样结束后，需冲洗色谱柱，色谱柱很脆弱，需用心保护。16、液相用完后，请关闭液相色谱在线工作站，依次关闭液相色谱仪上的开关，最后关闭计算机。17、将自己的色谱柱换下时，需用连接管代替色谱柱连在液相上，不可以让其暴露在空气中。18、从计算机中拷取谱图必须使用CD/DVD盘刻录

5、，不可直接使用U盘。19、请大家共同维护液相色谱仪，每次做完液相，请收拾液相台面，注意台面的整洁，并注意废液瓶，及时倒出废液。