探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化.pdf

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1、..§探究培养液中酵母菌种群数量的动态变化一.材料用具:酵母菌贮用培养液、无菌葡萄糖溶液、血细胞计数板、盖玻片、移液管、滴管、有螺旋盖的试管、试管架、记号笔、直尺、坐标纸、比浊计(比色计)、显微镜。二.材料简介:1.选用酵母菌的原因:1.酵母菌是单细胞真核生物;2.生长周期短,繁殖速度快,世代间不重叠。2.血球计数板:具体操作方式:用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,让培养液自行渗入。(多余的培养液用滤纸吸去)★计数板:五点取样法1个大方格=16个中方格=400个小方格(16×25)3.比浊计(比色计):测定溶解度。三.实验步骤Ⅰ.配置

2、样品并分组(配置2个样品):用记号笔标记有螺旋盖的试管A、B;A组(10mL无菌葡萄糖溶液+0.1mL酵母菌贮用培养液)B组(10mL无菌葡萄糖溶液);...注:酵母菌可以用液体培养基培养。Ⅱ.细胞计数(抽样检验方法)1.拧紧试管盖将试管A轻轻震荡几次(目的:使酵母菌分布均匀,减少误差)。2.用滴管从试管中取1滴培养液到血球计数板的方格区,盖上盖玻片,让培养液自行渗入。静待片刻,待酵母菌细胞全部沉降到计数室底部,将计数板放在显微镜的载物台上,计数一个小方格内的酵母菌数量。3.试管B重复该步骤;4.样品2重复2、3。★计数注意事项:细胞总数计算方法:每方格内细胞

3、数(细胞数÷方格数)×2500×102500:每方格体积=2mm×2mm×0.1mm=0.4mm21mL=1cm2=1000mm21000÷0.4=2500个(每毫升方格数)10:一试管大约为10mL。盖1.计数顺序:左上右上右下左下;2.压在方格线上的细胞,只计左线和上线上的细胞数;3.细胞间若有粘连(死亡),则数出团块中的每一个细胞;4.出芽酵母的芽体体积若超过细胞体积的1/2,则算独立个体。芽体出芽生殖——无性生殖5.用比浊计测定各试管的浑浊程度(探究酵母菌数量变化与其浑浊度之间的关系)6.记录数据,求平均值时间1234567;...组别样品1样品2平均

4、Ⅲ.培养1.第2天,重复1-5,在坐标纸上标记当天样品的浑浊度读数与酵母数。用直尺连接两个标记点,依据此线的延长线估算此后两天的酵母数量。2.第4和第7天进行计数,每天用比浊计测定混合度并记录。(也可每天计数)★注:1.每天计数酵母菌的时间要固定;2.若方格内细胞数目多于300个或数不过来,则稀释(详见书P73)Ⅳ.整理数据,绘制种群数量变化曲线105~109图一.酵母菌数量变化及其浑浊度的关系(横坐标:浑浊度(0~100);纵坐标:细胞数)图二.酵母菌种群数量随时间变化曲线(横坐标:时间/天;纵坐标:细胞数)★图表分析:1.A曲线:趋于平稳——营养成分减少,

5、种内斗争加剧;下降:细胞代谢毒素增加,使细胞死亡(死亡率>出生率);...2.B曲线:温度低于最适浓度,酵母菌数量增长缓慢;3.C曲线:没有营养物质。Ⅴ.分析数据,得出结论补充实验:探究酵母菌的呼吸方式;.

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