菌落总数测定操作规程.doc

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1、检测中心微生物文件文件编号：OLQ-JLZ001菌落总数测定操作规程第1页共1页颁布日期：2011年1月10日适用范围：食品检样经过处理，在一定条件下培养（如培养基成分、培养温度和时间、pH、需氧性质等），所得1m1（g）检样中所含菌落的总数。本方法规定的培养条件下所得结果，只包括一群在营养琼脂上生长发育的嗜中温性需氧的菌落总数。操作内容：1、检验程序：检样→做成几个适当倍数的稀释液→选择2-3个稀释度各取1ml分别加入灭菌培养基内→每皿内加入适量营养琼脂（36±1℃，24±2h）→菌落计数→报告2、操作方法：2.1以无菌操作

2、，将检样25g（ml）放于含有225ml灭菌生理盐水或其他稀释液的灭菌玻璃瓶内（瓶内预置适当数量的玻璃珠）或灭菌乳钵内，经充分振摇或研磨做成1：10的均匀稀释液。2.2用1ml灭菌吸管吸取1：10稀释液1ml，注入含有9ml灭菌生理盐水或其他稀释液的试管内（注意吸管尖端不要触及管内稀释液），振摇试管混均，做成1：100的稀释液。2.3另取1ml灭菌吸管，按上条操作顺序，做10倍递增稀释液，如此每递增稀释一次，即换用1支1ml灭菌吸管。2.4根据食品卫生标准要求或对检污染情况的估计，选择2-3个适宜稀释度，分别在做10倍递增稀释

3、的同时，即以吸取该稀释度的吸管移1ml稀释液于灭菌培养皿内，每个稀释度做2个培养皿。2.5稀释液移入培养皿后，应及时将凉至46℃营养琼脂培养基注入培养皿约15ml，并转动培养皿使混合均匀。同时将营养琼脂培养基倾入加有1ml稀释液灭菌培养皿内作空白对照。2.6待琼脂凝固后，翻转平板，置36℃±1℃温箱内培养48h±1h3、菌落计数方法：3.1做平板菌落计数时，可用肉眼观察，必要时用放大镜，以防遗漏。在记下各平板的菌落后，求出同稀释度的各平板平均菌落总数。