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时间:2017-12-14
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1、红细胞沉降率测定DeterminationofErythrocyteSedimentationRate红细胞沉降率(erythrocytesedimentationrate,ESR)简称血沉,是指在一定条件下,离体抗凝血在静置过程中,红细胞自然下沉的速率。红细胞带负电荷相斥而形成间距离体血液静置时,比重大于血浆下沉。【检测原理】红细胞下沉分为3个阶段:①红细胞缗钱样聚集期(lagphase):约需10min。②红细胞快速沉降期(decantationphase):约40min。③细胞堆积期(packingphase):此期红细胞缓慢下降,紧密堆积于容器
2、底部。血沉测定实际上是测量红细胞下沉后残留血浆段的高度或长度,ESR这一术语并不恰当,正确的表达应该是“lengthofsedimentationreactioninblood,LSRB”。1.手工法待红细胞沉降完成第三个阶段(1h)后,读取澄清的血浆段的高度,代表红细胞沉降速率。2.自动血沉仪法根据红细胞下沉过程中血浆浊度的改变。采用光电比浊、红外线扫描或摄影法动态分析红细胞下沉各个时段血浆的透光度。【方法学评价】血沉测定方法分为手工法和自动血沉仪法两大类。手工法又包括魏氏法、温氏法和潘钦科夫法。1.魏氏(Westergren)法魏氏法是ICSH(Inte
3、rnationalCouncilforStandardizationinHaematology)推荐的参考方法,也是我国推荐的参考方法。美国国家临床实验室标准委员会(NationalCommitteeforClinicalLaboratoryStandards,NCCLS)综合了ICSH专家组近期的一些建议,建立了新的ESR检验“参考方法”和供常规使用的“选择方法”,分别制定了新的操作规程。新方法对血沉管的规格、抗凝剂的使用、测试用血标本的制备方法等做了重新规定。2.自动血沉仪法目前临床广泛应用的是全自动血沉仪,主要有两种类型。(1)以温氏法为基础的血沉仪:采
4、用温氏法塑料血沉管,测定枸橼酸钠抗凝静脉血(1∶4)。仪器每45s扫描1次,30min后报告温氏法和换算后的魏氏法两种结果;并打印H-t关系图形。该仪器检查快速,但在测试时将血沉管倾斜,势必人为造成一定误差。(2)以魏氏法为基础的血沉仪:1∶4抗凝的静脉血标本放入测定室后,仪器自动定时摄像或用红外线扫描(后者检测结果不受溶血、黄疸等影响)。将红细胞下沉过程中血浆浊度的变化进行数字转换,1h后根据成像情况及数字改变,计算血浆段的高度,经过数据处理,报告魏氏法血沉结果(mm/h)。方法评价魏氏法操作简便,ICSH对此法有严格的规定,为ICSH推荐的参考方法。但只反
5、映血沉终点的变化,且耗时、易造成污染,缺乏特异性,一次性血沉测定器材质量难以保证潘氏法测定毛细血管血,较适用于儿童,结果与魏氏法具有可比性。但采血时易混入组织液,临床较少使用温氏法按HCT测定的方法要求采血,并通过血沉方程K值计算,克服了贫血对结果的影响,多用于血液流变学检查ζ血沉率使用专用的离心机,有配套的平底离心管。结果无年龄性别差异,不受贫血及实验条件的影响。灵敏度高、测试时间短,但在我国未能得到普及自动血沉仪可反映血沉不同阶段的差异,微量化、自动化、快速化,适用于急诊病人血沉测定的方法学评价【质量控制】血沉测定是一个既不可重复,又无法校准的项目。只要注
6、意做到标本、器材、试剂和操作符合规定要求,血沉结果就处于质控状态。使用质控标本,按照参考方法进行同步测定,其95%可信限应控制在误差<±0.5mm/h,但目前尚无理想的质控物供应。ICSH规定参考方法的质控标本为EDTA盐抗凝静脉血,血沉测定值在15-105mm/h之间,HCT≤0.35。项目要求病人准备①检查前控制饮食,避免一过性高脂血②输入葡萄糖、聚乙烯吡咯烷酮、白明胶等,2d内不宜做ESR检查抗凝剂①枸橼酸钠浓度为109mmol/L②与血液之比为1∶4③新鲜配置,使用不能超过1周。不用时于4℃冷藏保存血液标本①真空采血或普通注射器采血②静脉采血应在30s
7、内完成③不能有凝血、溶血、气泡,不能混入消毒液。④与抗凝剂必须混匀充分⑤血液标本于室温下放置不超过4h,4℃贮存不超过12h魏氏法的质量控制中对病人、抗凝剂和血标本的要求项目要求血沉管①内侧壁呈均匀的圆柱型,且清洁干燥②用水-丙酮系统冲洗,不提倡用清洁液或混合去污剂清洗③管长(300.0±1.5)mm,内径(2.55±0.15)mm,管径的不均匀误差≤0.05mm④上下口圆滑、整齐⑤血沉管表面自上而下刻有0~200mm刻度,最小分度值1mm(误差≤0.02mm)血沉管的位置①放置血沉管的位置要平稳②血沉管与血沉架要垂直测定温度室温过高要进行血沉校正,室温低于1
8、8℃应放置20℃恒温箱内测定测定时间严
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