激光显微切割技术在植物生物学研究中的应用.pdf

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1、中国患学c童搪2015，31(18)：121—125ChineseAgriculturalScienceBulletin激光显微切割技术在植物生物学研究中的应用陈彬丽，王英旗，郑彩霞(北京林业大学生物科学与技术学院，北京100083)摘要：植物组织的发生、分化和生理响应是复杂多因素调控的结果，要在分子水平认识其机理，就必须分析相应细胞的代谢物和基因表达情况，该步骤的前提是精确地获得这些细胞。应用激光显微切割技术(LaserMicrodissection，LMD)可以在显微镜下快速准确地分离、获取单一的细胞

2、类群，甚至单个细胞，成功地解决了组织中细胞的异质性问题。文章归纳了LMD技术的一般操作流程，对比分析了不同操作步骤的优缺点，对其在植物分子生物学、蛋白质组学、代谢物组学研究中的应用情况作了综述，指出存在问题并展望未来。关键词：激光显微切割；植物生物学；操作流程；研究进展中图分类号：O94．34文献标志码：A论文编号：easb15030215ResearchProgressofLaserMicrodissectionTechniqueforPlantChenBinli，WangYingqi，ZhengCai

3、xia(CollegeofBiologicalSciencesandTechnology,BeijingForestryUnwe~ity，Beijing100083)Abstract：Genesis，differentiationandphysiologicalresponsesaretheresultsofcomplexmulti—factorregulationinplanttissue．Toundemtanditsmechanismatthemolecularlevel，weneedtoanalyz

4、ethemetaboliteandgeneexpressionofrelatedcellswithaprerequisiteofobtainingthesecellsprecisely．Lasermicrodissection(LMD)ensuresthatpuretargetedcellsubgroupsorevenasinglecellcanberapidlyandaccuratelycapturedunderamicroscope，whichsolvestheproblemofcellheterog

5、eneityintissuesuccessfully．ThisreviewsummarizedthegeneraloperationprocessofLMDtechnology，comparedthemeritsanddemeritsofval~ousworkingapproaches．Furthermore，thisarticlegeneralizedtheapplicationeffectsofLMDinresearchesofplantmolecularbiology，proteomies，meta

6、bolomics，pointedoutcertainexistingissuesandthefutureapplicationprospect．Keywords：lasermicrodissection；plant；operationprocess；researchprogress0引言要了解某一细胞或组织的内部情况，将其与周围异质与低等生物不同，高等植物是复杂而有序的有机细胞分离、进行单一分析是必须的步骤。激光显微切体，不同的功能往往由空间分布不同的组织或器官承割技术(LaserMicrodissect

7、ion，LMD或LM)作为一项担，而其中每种组织、器官又是由多种各司其职的细胞新型细胞、组织分离技术应运而生，该种技术使用激光构成的Ⅲ，研究表明，已知的植物细胞共有40余种口】。显微切割系统将研究者需要获取的组织区域、甚至单在以往的研究中，通常将包含了多种细胞的组织作为一细胞从组织切片中分离出来，具备方便快捷、精确无直接的试验材料，其结果一般都为几类细胞的均值。污染等特点，成功的解决了细胞异质性问题【。基金项目：国家自然科学基金项目“油松胚珠发育关键基因的表达组织特异性及功能研究”(31170563)。第

8、一作者简介：陈彬丽，女，1989年出生，广西玉林人，在读硕士，主要从事植物生长发育的分子学机理等方面的研究。通信地址：100083北京市海淀区清华东路35号，Tel：010．62337717，E．mail：ehenbinli@b{fu．edu．cn。通讯作者：郑彩霞，女，1955年出生，宁夏平罗人，教授，博士，主要从事植物生理生化和植物生长发育等方面的研究。通信地址：100083北京市海淀区清华东路35号，Tel：010．62