输血前检查中的不规则抗体筛选课件

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1、输血前检查中的不规则抗体筛选各位来自输血行业的朋友:你们好!现向诸位介绍本人在血型血清学临床实践工作中的一点体会,供大家参考，欢迎讨论指正不规则抗体的筛选不规则抗体产生原因：输血、妊娠对受血者的血清或血浆进行抗体筛查是非常必要的，因为有临床意义的抗体会导致溶血性输血反应，破坏输入的不配合的红细胞或缩短其寿命，或引起新生儿溶血病。不规则抗体的筛选重要性抗体筛选的重要性可以在配血前早期发现和确认具有临床意义的意外抗体，获得充足的时间来选择缺少相应抗原的相配合的血，避免一些可能的情况造成病情延误。待检血液样本要求样本管上要明确标注能确认被检者身份的信息。如姓名、

2、住院号等。可采用EDTA抗凝、肝素抗凝以及不抗凝血样。EDTA能螯合钙并阻止补体激活，避免补体附着在筛选红细胞上引起非特异性反应。建议不要使用血清分离管：因为管中有凝胶，很难获得不被凝胶污染的自身红细胞。溶血的标本不能使用，因为可能掩盖抗体引起的溶血。自身细胞、筛选细胞使用前最好洗涤病历信息临床诊断妊娠史输血史近期使用的药物种族抗体筛选的试剂抗体筛选红细胞抗人球蛋白试剂增强介质的添加LissPEG4000酶凝聚胺抗体筛选用的红细胞抗体筛选用的红细胞：双人份细胞和三人份细胞组。其Rh血型为：CCDee、ccDEE、和ccdee.必须具备全部Rh因子，还应该含

3、有其他常见抗原：M,N,S,s,,Lea,Leb,k,Fya,Fyb,Jka,和Jkb抗原，还必须具有Dia抗原。两细胞和三细胞的筛选红细胞示意图RhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++oRhKellDuffyKiddLewisPMNLutheranXgCellDCcEeKkFyaFybJkaJkbLeaLebP1MNSsLuaLubXgaR1R1

4、++oo++++o++o+o++++o++R2R2+o++oo++++o+o++o++++orroo+o+o++++o+o+o++++o+筛选红细胞试剂红细胞是保存在保存液中，一旦用生理盐水或Liss液洗涤后则应该在２４小时内使用，否则会因污染、抗原（Lewis系统抗原）丢失导致试验错误。抗人球蛋白试剂抗人球蛋白分类：单特异性的抗-IgG，抗C3d，多特异性的抗IgG+C3d。抗-IgG、抗IgG+C3d的多特异性抗球蛋白试剂都可用于抗体检测。抗IgG+C3d可增加一些补体依赖稀有抗体的检出，如Kidd血型系统的一些抗体;与单纯的抗IgG相比，抗IgG+C

5、3d与这些需要补体参与反应的抗体可产生更强的反应。多特异性抗球蛋白试剂的缺点是容易产生假阳性反应。使用抗IgG可以避免补体引起的非特异反应，但降低了补体依赖抗体的检测灵敏度。抗体筛选技术（1）技术要求：尽可能多的检测出有临床意义的抗体。(灵敏度高）尽可能少的检测出无临床意义的抗体。（特异性好）尽可能快的完成抗体检测。（简单、快速、易操作）抗体筛选技术（2）选择的技术不仅要能检查出不配合的IgM抗体，还必须能检查出尽可能多的不配合的IgG抗体。最大限度的减少抗体的漏检。每种方法都有自己的特点，适应于不同范围及情况。到目前为止，还没有任何单一的技术方法可以检测

6、出所有的血型抗体。抗体筛选技术（3）在进行抗体筛选时，不能只选用IAT方法，必须同时选用立即离心技术和其他技术。立即离心法是间接抗人球法无法替代的。抗体筛选技术（盐水试验）立即离心盐水试验技术：可以用于检测IgM性质的盐水反应活性抗体。此方法缺点是检查出无临床意义的抗体，如冷凝集素抗－Ｉ及抗－ＩＨ等；且漏检IgG性质的抗体。发现和确认缗钱现象发现冷特异性抗体（如抗-Lea)发现冷自身抗体抗体筛选技术（经典间接抗人球蛋白试验）程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，37℃孵育45-60分钟，生理盐水洗涤3遍后倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结

7、果。用抗体致敏的红细胞检测试验结果的正确性。优点：特异性好。缺点：灵敏度比Liss-IAT、PEG-IAT、凝胶卡差，耗时长。抗体筛选技术（LISS-间接抗人球蛋白试验）原理：1、Liss液可以降低红细胞周围的离子云，促进抗体致敏红细胞。2、降低反应体系中的离子强度，使抗体易于接近抗原，缩短红细胞致敏时间优点：1、缩短孵育时间2、使用抗-IgG，可以减少假阳性反应。缺点：1、易出现假阳性反应2、方法的灵敏度要弱于PEG-IAT法程序：2滴血清、1滴2-5%的红细胞，加2-4滴LISS液后混匀，37℃孵育15分钟，离心观察细胞的凝集情况，用生理盐水洗涤3遍后

8、倾倒上清液，控干，加2滴抗人球蛋白试剂，离心后判读结果。抗体筛选技