马铃薯黄萎病室内抗性鉴定规程.doc

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1、ICS 点击此处添加ICS号点击此处添加中国标准文献分类号     DB15内蒙古自治区地方标准DB15/XXXXX—XXXX     马铃薯黄萎病室内抗性鉴定技术规程TechnicalRegulationforIndoorResistantIdentificationtoPotatoVerticilliumWilt点击此处添加与国际标准一致性程度的标识     XXXX-XX-XX发布XXXX-XX-XX实施 内蒙古自治区市场监督管理局   发布DB15/XXXXX—XXXX前  言本标准按照GB/T

2、1.1-2009给出的规则起草。本标准由内蒙古农业大学提出。本标准由内蒙古自治区农牧厅归口。本标准起草单位：内蒙古农业大学。本标准主要起草人：王东、周洪友、赵君、孟焕文、张笑宇、张键、马平、张力群、李社增4DB15/XXXXX—XXXX马铃薯黄萎病室内抗性鉴定技术规程1　范围本标准规定了室内条件下马铃薯抗黄萎病的鉴定技术规程。本标准适用于马铃薯品种（系）在室内条件下对黄萎病抗性水平的鉴定。2　规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件，仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注

3、日期的引用文件，其最新版本（包括所有的修改单）适用于本文件。NY/T2952-2016棉花黄萎病抗性鉴定技术规程。3　材料准备3.1　培养基制备PDA培养基：马铃薯200g、葡萄糖20g、琼脂粉18g，定容至1000mL；121℃高压湿热灭菌25min，冷却至室温备用。麦麸培养基：将麦麸与水按质量比1：1搅拌均匀后，装入1000mL三角瓶中，每瓶装入100g；121℃高压湿热灭菌30min，冷却至室温备用。3.2　供试菌株供试黄萎病菌：选用内蒙古马铃薯主栽区发病植株上分离获得的致病菌株。菌株活化及培养：

4、将保存的黄萎病菌菌株置于PDA平板进行活化。25℃条件下，培养5d～7d后，待菌丝长到培养皿的3/4时，用打孔器在菌落边缘打取直径5mm的菌饼，接入灭菌的麦麸培养基中，黑暗条件下培养15d。3.3　对照品种选择抗病对照品种选择克新1号，感病对照品种选择费乌瑞它。4　鉴定方法4.1　接种液制备向长满黄萎病菌的麦麸培养物中加入无菌水，经4层纱布过滤获得孢子悬浮液。在显微镜下通过血球计数板计数，并孢子悬浮液的浓度调至107个孢子/mL。4.2　接种方法4DB15/XXXXX—XXXX将种薯进行育苗，当幼苗长到

5、2～4片真叶时，将幼苗取出并轻微伤根，采用蘸根法将幼苗浸入接种液15min；将幼苗移栽至装有灭菌土的花盆，放置于25℃、16h光照/8h黑暗条件下进行培养20d。1.1　病情调查记录室内马铃薯植株的地上部黄萎病发病情况并进行分级，分级标准参见附录A，计算发病率和病情指数发病率=（发病总株数/调查总株数）×100%；病情指数DI=［Σ（各级病株数×该病级代表数值）/（调查总株数×最高级代表数值）］×100。2　品种抗性水平划分依据各品种的病情指数对不同来源品种抗性级别进行划分，划分标准如下表：马铃薯对黄萎

6、病抗性分级标准抗病型病情指数DI免疫Immune0高抗HighResistant0＜DI＜10.0抗病Resistant10.0≤DI＜20.0耐病Tolerant20.0≤DI＜35.0感病SensitiveDI≥35.04DB15/XXXXX—XXXX4DB15/XXXXX—XXXXAA附　录　A（规范性附录）马铃薯黄萎病发病程度分级标准根据马铃薯的发病程度，分为0、1、2、3、4级共5个级别，其分级标准如下：0级：健株，叶片无症状；1级：病株叶片25%以下出现症状，叶肉变为淡黄色或呈不规则形的黄色

7、病斑；2级：病株叶片25%～50%表现症状，病斑颜色大部分变成黄色或黄褐色，叶片边缘略有卷枯；3级：病株叶片50%以上表现症状，有少数叶片凋落；4级：全株叶片发病，多为褐色掌状枯斑，叶片有的脱落成光杆，以致整株枯死。_________________________________4