一种棉花枯萎病抗性鉴定的新方法-论文.pdf

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1、中国棉花·一种棉花枯萎病抗性鉴定的新方法·2013,40(1015二7一种棉花枯萎病抗性鉴定的新方法李志芳。冯自力。赵丽红,师勇强,朱荷琴(棉花生物学国家重点实验室/中国农业科学院棉花研究所,河南安阳455000)ANewMethodforResistanceIdentificationofCottonVarietiestoFusariumWiltLIZhi-fang,FENGZi—li,ZHAOLi-hong,SHIYong-qiang,ZHUHe-qin摘要:本文建立了一种棉花枯萎病抗性鉴定的新

2、方法——适乐时包衣菌土营养钵法。通过设置菌土中枯萎菌的浓度梯度(0.4、0.6、0.8、1_0、2.0),选用适乐时包衣和温汤浸种2种方法,统计出苗率和病情指数。结果显示,菌土浓度为0.4和0.6时,棉花品种的出苗率最高;菌土浓度为0.6时,棉苗发病均匀,感病对照的实际病指在50左右。用适乐时包衣会显著提高出苗率,且对枯萎病的发生没有影响。该方法推荐使用的菌土浓度为0.6,并结合使用适乐时包衣进行棉花材料和品种的抗枯萎病性鉴定。采用该方法分3批试验共鉴定了60个棉花品种,一致性好,可比性强,结果可靠

3、。该方法具有准确、快捷和经济的特点。关键词:棉花;品种;枯萎病;包衣中图分类号:$435.621文献标志码:A文章编号:1000-632X(2013)10-0015~03棉花枯萎病是一种世界性的危险病害,和黄萎多次优化和规范,制定出了准确、快捷、重复性好的病被并列为棉花上的两大病害,严重影响棉花生棉花枯萎病抗性鉴定方法——适乐时包衣菌土营养产,也是多数国家棉花入境的检疫对象]。Atkin—钵法。son于1891年首先在美国亚拉巴马州发现并报道了这一病害,并将其主要病原菌鉴定为Fusariuml材料和

4、方法0zsporumf.sp.vasinfectumAtk.。冯肇传于1.1枯萎病菌培养1931年首次在我国华北地区发现了枯萎病_2],之后本研究选用棉花枯萎病菌7号生理小种,分离病区随着棉花种子调运逐渐扩大。到了2O世纪7O自中国农业科学院棉花研究所白璧试验田,在马铃年代该病已经发展为棉花的主要病害,甚至致个别薯蔗糖(PDA)培养基上进行单孢纯化。从PDA平老植棉区出现了绝产[3]。棉花枯萎病菌可以在棉板上的菌落边缘挑取2mm。的新鲜菌块,接种到查花的整个生育期危害,主要症状有:黄化型、黄色网比克

5、液体培养基(NaN0。,2.00g;KHPO,1.O0纹型、青枯型、紫红型和皱缩型。由于枯萎病菌在g;KC1,0.50g;MgSO4·7H2O,0.50g;FeSO4,子叶期即可发病,因此科研工作者往往在棉花苗期0.01g;蔗糖3O.O0g;用水定容至1000mL)中,置开展抗枯萎病性鉴定工作。早期主要采用苗床病于25℃下,150r·min-,黑暗培养4~5d。吸取圃法[4],由于病圃的建立需要相对隔离的环境,还要上述液体培养的菌悬液15mL转接至装于广口瓶设置活动防雨遮光棚,受自然条件的制约较大,

6、已被的玉米沙.土(质量比1:1)培养基里,随后放人逐渐淘汰。目前,普遍依据国家标准(GB/T25℃培养箱中静置培养7d,待枯萎病菌的菌丝布22101.4-2009)采用纸钵土壤接菌盆栽法l5]对棉花品满广口瓶,将培养物掏出,自然条件下风干备用。种(系)进行抗枯萎病鉴定。但是,在实际操作中遇1.2棉花枯萎病菌菌土基质的制备到了一些问题,比如:土壤需要高温灭菌,费工费时;取多年未种植过棉花的生砂壤土,在太阳下暴接菌量过大,造成出苗不均匀;包衣剂多菌灵对枯萎晒3~4d,过4O目筛。然后分别拌入菌体配成棉病

7、菌具有杀灭作用,导致棉苗不正常发病等。因此,花枯萎病菌质量百分数为0.4、0.6、0.8、本研究连续安排了3年试验,对关键技术环节进行1.0%、2.0的玉米沙土培养物,充分混合均匀,分装到直径6cm、高10cm的无底纸钵中。收稿日期:2013—07—03*通讯作者1.3供试棉花品种基金项目:国家科技支撑计划项目(2011BAD35B09)抗病品种中植棉2号、耐病品种中棉所45、感·15·病品种冀棉11及2012年育种单位提供的60个包感病对照的实际病情指数应为40.O~66.7,方可应括国家区试和省

8、级区试的待测棉花品种。用于相对病情指数的校正)。1.4种子处理及播种以相对病情指数来划分供试品种的抗病类型,种子经硫酸脱绒,用55~60℃温水浸泡30共5级(表1)。rain,然后加入凉水,浸泡12h后淋于,每钵5粒;表1棉花品种抗枯萎病性分级标准将种子均匀分散在营养钵内,轻轻按压,覆盖灭菌抗性类型英文缩写相对病情指数沙土1.5C1Tt厚,用手抚平。包衣播种则提前将种免疫10.0子和1的适乐时(2.5咯菌腈,购自先正达公司)高抗HRO~5.0拌匀包衣,再播种至营养钵内

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