两种转染人宫颈癌HeLa细胞的方法学比较-论文.pdf

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1、临床和实验医学杂志2014年8月第13卷第16期·l32l·[16]PoplinE,FengY,BerlinJ,eta1.PhaseIII,randomizedstudyofgem—vancedpancreaticcancertreatedwithgemcitabinealoneorgemcitabinecitabineandoxaliplatinversusgemcitabine(fixed—doserateinfusion)pluscisplatin:retrospectiveanalysisofamuhicenterstudy[J].Jcomparedwithgemcitabin

2、e(30一minuteinfusion)inpatientswithpan-BUON,2012,17(1):102—105.creaticcarcinomaE6201:atrialoftheEasternCooperativeOntology[19jBoekS,HinkeA,WilkowskiR,eta1.AnalysisofprognosticfactorsGroup[J].JClinOncol,2009,27(23):3778—3785.inpatientswithadvancedpancreaticcancer:subgroupanalysisofaran·[17]Colucci

3、G,LabiancaR,DiCostanzoF,eta1.RandomizedphaseIIItri-domizedphaseIlltrialcomparingsingle—agentgemcitabinetothegem—alofgemcitabinepluscisplatincomparedwithsingle—agentgemcitabinecitabinepluscisplatincombination[J].JClinOncol,2005,23(16asfirst—linetreatmentofpatientswithadvancedpancreaticcancer:theS

4、upp1):4105—4l1O.GIP一1study[J].JClinOncol,2010,28(10):1645—1651.(收稿日期:2014—05—16)[18]InalA,KosFT,AlginE,eta1.Prognosticfactorsinpatientswithad—DOI:10.3969/j.issn.1671—4695.2014.16.006文章编号:1671—4695(2014)16—1321—03两种转染人宫颈癌HeLa细胞的方法学比较郑红云李艳申复进(武汉大学人民医院1检验科;2妇产科湖北武汉430060)【摘要】目的比较两种不同的转染方法,即Lipofect

5、amine2000和NucleofectorKit转染人宫颈癌Hela细胞的转染效率。方法分别选取Lipofectamine2000转染和Amax核电转(AmaxNucleofectorKit)两种转染方法。HeLa细胞培养贴壁达到85%一90%后传代获取HeLa单细胞悬液,细胞分成2管,其中1管直接采用核电转法转染红色荧光蛋白(DsRed)后种植于1.5rrIl的细胞培养J~/-;另一管先种植于细胞培养皿,待贴壁24h后采用Lipofectamine2000转染DsRed。细胞的存活率采用台盼兰进行检测。分别比较两者转染效率及转染前后细胞的存活率,进一步探讨NucleofectorK

6、it核电转法的高效性。结果Lipofectamine2000的基因转染率仅为20.23%,而核电转法的转柒率为90.14%,后者为前者的4.46倍。Lipo—fectamine2000转染细胞前后的存活率分别为96.34%和90.76%,而核电转组分别为95.98%和78.35%。结论细胞核电转法能高效稳定地转染人宫颈癌细胞株HeLa细胞。【关键词】宫颈癌HeLa细胞转染Lipofectamine2o00核电转红色荧光蛋白ComparisonoftwotransfectedmethodsforhumancervicalcarcinomaHelacells.ZHENGd,—yun,LIr

7、an,SHENFu一丘n.1Depart—mentofClinicalLaboratory;2DepartmentofObstetricsandGynecology,ThePeople~HospitalofWuhanUniversity,WuhanHubei430060,China.【Abstract】0bjectiveHumancervicalcarcinomacelllineHeLaisoneofthemostcommonusedcells

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