鸡场大肠杆菌的分离与药敏试验-论文.pdf

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1、养禽鸡场大肠杆菌的分离与药敏试验李季,陈全洲(河南省遂平县畜牧局。遂平463100)摘要:对某规模化鸡场发生的疾病进行调查,根据临床症状、病理变化将疑似大肠杆菌病20份病鸡的肝脏样品经细菌培养、镜检和生化试验等实验室方法分离鉴定出18株大肠杆菌。动物实验表明所分离的大肠杆菌均具有很强的致病性。用临床上常用的9种抗茵药物对分离菌株进行药敏试验,结果表明,所分离的大肠杆菌对阿莫西林、丁胺卡那霉素、氟苯尼考和头孢噻呋高度敏感,对庆大霉素中度敏感,对青霉素、红霉素、恩诺沙星和链霉素等产生耐药性。关键词:鸡;犬肠杆菌;分离鉴定;药敏试验DoI:10.

2、3969/J.ISSN.1671-6027.2014.08.082近年来,随着我县养鸡业的日益发展和集约化程度的提每组10只,第1组至第18组为实验组,分别腹腔接种分离高,本病也是我县养鸡业发病率较高、危害较为严重的疾病的18株大肠杆菌肉汤培养物,每只O.2mL,第19组为对照之一。大肠杆菌对药物极易产生抗药性,因此应在感染早期组,常规饲养。观察发病情况,于雏鸡死后,剖检观察病理变对分离出的大肠杆菌进行药敏试验,选择对禽大肠杆菌病最化,并且无菌操作采心血涂片,革兰氏染色,镜检。敏感有效的或选用本场过去少用的药物全群给药。本试验首1.2.5药

3、敏试验对分离到的18株菌株进行了药敏试验,先根据病死鸡的临床症状和病理变化等作出初步诊断,并通共检测9种药物,包括阿莫西林、丁胺卡那霉索、氟苯尼考、过实验室检查确诊。通过药物敏感试验选择对大肠杆菌敏感头孢噻呋、庆大霉素、青霉素、红霉素、恩诺沙星和链霉素。根的药物,提出治疗方案,推荐给广大养殖户,以减少大肠杆菌据NCCLS标准判定结果。病带来的经济损失。2结果1材料与方法2.1剖检变化经剖检可见:病死鸡剖检均发现以肝周炎、1.1材料心包炎变化为主,即俗称“包心包肝”。特异性恶臭味,腹腔有1.1.1病料来源2014年2月采自某规模化鸡场20份病

4、死积液,呈浅黄色。鸡的肝脏。2.2染色镜检肝脏涂片革兰氏染色镜检,均为阴性小杆1.1.2仪器与试剂阿莫西林、丁胺卡那霉素、氟苯尼考、头菌,单个散在,两端钝圆,表面光滑湿润,两极着色较深,边缘孢噻呋、庆大霉素、青霉素、红霉素、恩诺沙星和链霉素药敏整齐的小菌群。符合大肠杆菌的形态特征,结合临床症状和纸片均由杭州微生物制品有限公司生产。麦康凯培养基、革病理变化,初步判断为大肠杆菌感染。兰氏染色液、高压灭菌锅、恒温培养箱、超净工作台、显微镜、2.3细菌分离结果分离菌经37℃培养24h,在麦糠凯琼脂冰箱和常用玻璃仪器等均由和县畜牧兽医局实验室提供。上

5、形成红色、圆形、隆起、光滑湿润及边缘整齐的中等大菌1.2方法落,在普通琼脂斜面上为灰白色菌落,培养物涂片,革兰氏染1.2.I染色镜检无菌操作采集病死鸡的肝脏组织,涂片进色,镜检,可见到革兰氏阴性、两端钝圆的小杆菌。行革兰氏染色,镜检。2.4生化试验结果各分离菌株均能发酵葡萄糖、麦芽糖、1.2.2细菌分离培养和形态学观察无菌操作取病死鸡的乳糖和甘露醇,产酸产气;能产生靛基质,不产生H2s;M.R.试肝脏组织分别接种于普通琼脂和麦糠凯琼脂培养基上,37℃验为阳性,V—P试验为阴性。试验结果符合大肠杆菌的生化培养24h,挑取培养基上的独立单在的菌

6、落接种于LB液体特征。培养基,37℃培养24h后,分别取上述菌落涂片,革兰氏染色2.5动物试验结果对照组10只仔鸡存活,无临床症状。攻镜检,在油镜下观察细菌的形态及染色特性。观察是否存在毒组接种后12h开始发病,24h后全部发病,于72h陆续死杂菌。对于已经纯化的细菌进行冷冻保存,未纯化的重复划亡。死前症状为精神沉郁,食欲不振,腹泻,排黄白稀粪,离群平板,镜检,直至纯化为止。呆立,昏睡,符合鸡大肠杆菌病的临床症状。死后剖检可见大1.2.3生化试验自制各种糖发酵管,取纯培养物分别接种肠杆菌典型病变,无菌操作取发病鸡的肝脏涂片、染色和镜于葡萄糖

7、、乳糖、麦芽糖和甘露醇等生化管中,置于37℃恒温检,镜下观察可见两端钝圆的短小杆菌,单个或成对存在,两培养箱中,培养1824h,观察发酵管的反应情况。按文献要求极着色较深,革兰氏染色阴性。生化试验结果同2.4,从而证自制各种生化试剂,取纯培养物分别做M-R.试验、V—P试验、明,动物实验的仔鸡被大肠杆菌感染。硫化氢试验和靛基质试验。2.6药敏试验结果所分离大肠杆菌对阿莫西林、丁胺卡那1.2.4动物实验190只健康30日龄雏鸡随机分为19组,霉素、氟苯尼考和头孢噻呋高度敏感,对庆大霉素中度敏感,··目墨翟雷躅··2014年第08期养禽一例蛋鸡

8、大肠杆菌与鸡痘混感的诊治李永森(辽宁省锦州市动物疫病预防控制中心,锦州121000)DOl:10.3969/J.ISSN.1671—6027.2014.08.0832013年11

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