SSR分子检测与田间小区种植鉴定扬两优6号纯度的比较-论文.pdf

《SSR分子检测与田间小区种植鉴定扬两优6号纯度的比较-论文.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。

1、叩闯种业研究论文SSR分子检测与田闻小区种植鉴定扬两优6号纯度的比较阳庆华李秀琼鲁孟海(北京金色农华种业科技股份有限公司，湖北武汉430070)摘要：以188份杂交水稻扬两优6号种子样品为材料，分实性；(2)观察群体内一致性，在抽穗前找出叶型异常的别进行SSR分子检测和田间小区种植鉴定。将两种检测方法的杂株；(3)从待鉴样品始穗开始，每日观察，在待鉴样品结果进行配对t检验和相关分析，其结果表明两种检测结果无显中寻找不育系、恢复系及其他杂株。观察指标有株高、著差异，相关系数r=0．79，并通过DP

2、S数据分析软件求得其回抽穗时间、抽穗整齐度、包颈与否、叶型与叶色、穗型、粒归方程为：y=14．6449+0．8504x。说明利用SSR分子标记法检测型与粒色、稃尖颜色及深浅、芒有无与长短、结实率等。杂交水稻扬两优6号纯度是可行的，检测结果准确可靠。品种纯度(％)：垦二堡垦×1()(】％关键词：SSR；分子检测；种植鉴定；纯度仿*'it位I&思"t秫I,L数dtlSSR分子检测在湖南水稻所生物技术室进行。在种子纯度是种子质量的重要指标，纯度的高低直每个样品中分别随机取不少于500粒种子，在30℃培

3、接影响到农业生产的产量和品质。杂交水稻制种过程养箱发芽5～7d。取至少5棵幼苗，采用CTAB法提取中容易出现机械混杂、生物学混杂等，再加上不法经营DNA。将提取的DNA转移到96孔PCR板中，采用常者的人为掺假，导致杂交水稻种子的纯度和真实性受到用的48对引物进行筛选，每个引物加2个孑L。然后严重影响。目前通常采取田间小区种植鉴定判定杂交进行PCR扩增、凝胶电泳并成像，最后观察成像图谱，水稻种子的纯度和真实性，但田间小区种植鉴定需在根据成像结果，筛选出多态性好的引物。经过筛选，水稻整个生育期进行

4、，鉴定周期长，此外还受鉴定人员、RM208RM234RM424RM243RM154、RM246、环境和基因显隐性的影响，可能降低鉴定结果的准确RM224、RM164这8对引物的多态性较好，可作为扬性【l】。随着生物技术的发展，利用SSR分子标记技术鉴两优6号SSR分子检测的引物。定水稻种子的纯度和真实性已逐渐成熟，相比田间小区剪取0．5cm长的幼芽，分别放人96孔PCR板中(每种植鉴定，SSR分子检测能在短时间内鉴定种子纯度，孔1苗)。每孔加入DNA提取液，盖封板膜，煮沸后，并且鉴定结果不受鉴定

5、人员和季节的影响，具有重复性在每孔中加入提取缓冲液，形成样品DNA溶液。再加好、稳定性高、成本较低和易于操作等优点口]。但也有入PCR反应试剂(含有引物)后用于PCR扩增，然后其缺点，田间小区种植鉴定能将杂株分为亲本、串粉杂在琼脂糖凝胶上电泳检测，扫描成像并保存(图1)，只株、变异株等，而SSR分子检测对于串粉杂株(尤其是亲有1条带的为杂株，2条带的为正常F，最后统计检测缘关系较近的)和变异株较难区分。本研究就田问小区结果。每个PCR板用一种引物，每个样品做2次重复，种植鉴定结果和SSR分子检测

6、结果进行了简单的比较要求重复间引物不相同，如果重复间的结果相差不超分析。过2个点，取其平均值作为最后的纯度结果，否则重新{珏各1材料与方法。供检种子粒数一异常种子粒数1．1材料扬两优6号样品188份。品种纯度(％)=——X100％供检种子粒数1．2方法将每份样品平均分为2份，1份用于田间小区种植鉴定，1份用于SSR分子检测。田间小区种植鉴定于2011和2012年正季在江西南昌进行，其中2011年鉴定153份，2012年鉴定35份。每年3月25—28日播种，小区不设重复，顺序排列，每个样品种植50

7、0550株。鉴定田肥力中等，移栽返青后分蘖前记录实际株数。杂株识别按以下步骤进行：(1)从图1扬两优6号SSR分子检测图谱苗期开始，观察待鉴样品秧苗的长势长相，确定品种真研究论文寸闯种业2结果与分析2．2相关性分析对188份样品的纯度结果作折线图比2．1纯度检测结果SSR分子检测和田间小区种植鉴较分析(图2)可以看出，SSR分子检测结果与田问小区种定结果见表1。植鉴定结果变化趋势一致，结果基本吻合。再对以上结表1SSR分子检测及田间种植鉴定结果统计表一(％一)果进行相关分析，相关系数r=0．79

8、，具有显著的线性关系。吡m2∞．3船配对检验由于用两种不同检测方法得出的检测结果符合配对检验的要求，可用配对两处理71检验进行差异显著性检验。经配对检验，得出值为1．9054，在0．05水平上不显著，说明SSR分子检测和田问小区种植鉴定纯度无显著差异。=导景F-至墨三兰基墨虽墨三墨至墨三三墨量墨图2SSR分子检测与田间小区种植鉴定结果比较图2．4回归分析利用DPS数据分析软件对以上两组结导致试验误差大；其次是不同SSR标记的多态性检测能果进行逐步回归分析，得出SSR分子检测结果与田间小力差异大，