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《DB37T 3787-2019 水质 粪大肠菌群测定 光度法.doc》由会员上传分享,免费在线阅读,更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、ICS 13.060Z16 DB37山东省地方标准DB37/T3787—2019 水质 粪大肠菌群测定 光度法Waterquality—determinationoffecalcoliforms—photometricmethod2019-12-24发布2020-01-24实施山东省市场监督管理局 发布DB37/T3787—2019目 次前言II1 范围12 规范性引用文件13 术语和定义14 分光光度法15 荧光法46DB37/T3787—2019前 言本标准按照GB/T1
2、.1—2009给出的规则起草。本标准由山东省生态环境厅提出并组织实施。本标准由山东省环保标准化技术委员会归口。本标准起草单位:山东省生态环境监测中心、青岛佳明测控科技股份有限公司、北京华夏科创仪器股份有限公司。本标准主要起草人:李恒庆、由希华、宗雪梅、王婷、王聪、郑琳琳、邹康、潘光、周成、张芳、张爱芳。6DB37/T3787—2019水质 粪大肠菌群测定 光度法1 范围本标准规定了测定水中粪大肠菌群的分光光度法和荧光法。本标准适用于地表水、生活污水和工业废水中粪大肠菌群的应急现场快速测定。本方法的检
3、出限为30MPN/L,检测范围:30~109MPN/L,检测周期不大于18h。2 规范性引用文件下列文件对于本文件的应用是必不可少的。凡是注日期的引用文件,仅所注日期的版本适用于本文件。凡是不注日期的引用文件,其最新版本(包括所有的修改单)适用于本文件。GB/T14581 水质 湖泊和水库采样技术指导HJ/T91 地表水和污水监测技术规范HJ494 水质 采样技术指导3 术语和定义下列术语和定义适用于本文件。3.1 粪大肠菌群 fecalcoliforms44.5℃培养能发酵乳糖产酸产气的需氧及兼性
4、厌氧革兰氏阴性无芽孢杆菌。3.2 最大可能数 mostprobablenumber,MPN最大可能数(mostprobablenumber,缩写为MPN),又称稀释培养计数,是一种基于泊松分布的间接计数法。利用统计学原理,根据一定体积不同稀释度样品经培养后产生的目标微生物阳性数,查表估算一定体积样品中目标微生物存在的数量(单位体积存在目标微生物的最大可能数)。4 分光光度法4.1 方法原理一定量的水样与选择性培养基混合均匀放置于44.5℃环境下,粪大肠菌群产生β-半乳糖苷酶(β-D-galactos
5、idase),并分解色原底物释放出色原体使培养基呈现颜色变化,通过连续分光光度(波长:300nm~600nm)测定,依据待测水样色度变化与水中粪大肠菌群数成一定关系的原理,得出粪大肠菌群浓度。4.2 干扰和消除6DB37/T3787—20191.1.1 活性氯具有氧化性,能破坏微生物细胞内的酶活性,导致细胞死亡,可在样品采集(4.5.1)时加入硫代硫酸钠溶液(4.3.4)消除干扰。1.1.2 重金属离子具有细胞毒性,能破坏微生物细胞内的酶活性,导致细胞死亡,可在样品采集(4.5.1)时加入乙二胺四乙
6、酸二钠溶液(4.3.5)消除干扰。1.2 试剂和材料除非另有说明,分析时均使用符合国家标准的分析纯试剂。1.2.1 粪大肠菌群检测试剂主要成分:——蛋白胨:5g;——硫酸锰:0.005g;——硫酸镁:0.001g;——硫酸锌:0.001g;——磷酸盐:1.78g;——两性霉素B:0.60g;——蒸馏水1000mL。制法:上述试剂溶于蒸馏水中,充分混匀,调整pH值为7.2~7.4,68.95kPa(115℃),高压灭菌20min,分装贮存于4℃避光备用。注:也可采用市售商品化培养基制品。1.2.2 硫
7、代硫酸钠(Na2S2O3•5H2O)。1.2.3 乙二胺四乙酸二钠(C10H14N2O8Na2•2H2O)。1.2.4 硫代硫酸钠溶液:ρ(Na2S2O3)=0.10g/mL,称取15.7g硫代硫酸钠(4.3.2),溶于适量水中,定容至100mL,临用现配。1.2.5 乙二胺四乙酸二钠(EDTA-Na2)溶液:ρ(C10H14N2O8Na2•2H2O)=0.15g/mL,称取15g乙二胺四乙酸二钠(4.3.3),溶于适量水中,定容至100mL,此溶液保质期为30d。1.2.6 无菌水:取适量纯水,经
8、121℃高压蒸汽灭菌20min,备用。1.3 仪器和设备1.3.1 采样瓶:具螺旋帽或磨口塞的100mL、250mL、500mL广口玻璃瓶。注:在采集不存在或不考虑余氧、金属离子干扰的样品时,可采用市售无菌采样瓶或无菌采样袋。1.3.2 微生物快速检测仪:——恒温培养单元:不少于2个温控系统,温度控制精度1℃,可自动调节待检测样本培养温度(44.5℃±1℃);——检测单元:不少于4个独立的检测系统,可实现多个样本的同时监测;——数据显示、处理单元:自动输出检测结果,可
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