宫颈癌患者外周血调节性B细胞亚群检测及临床意义.doc

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1、宫颈癌患者外周血调节性B细胞亚群检测及临床意义摘要目的：检测宫颈癌患者外周血调节性B细胞的数量以及血清中IL-10及TGF-B的表达水平，探讨阮1在宫颈癌临床监测中的意义。方法：收集50例宫颈癌患者外周血标本，用间接免疫荧光法检测Brl细胞亚群的分布，用酶联免疫吸附试验(ELISA)检测血清中IL-10及TGF-B的表达情况。结果：宫颈癌患者外周血Brl的数量明显髙于正常对照组，IL-10的含量均明显高于正常对照组(P<0.05),宫颈癌浸润组与正常对照组相比，Brl的数量及IL-10明显升高(P<0.05)。结论：宫颈癌患者中Brl的数量及血浆IL-10明显升高，提示Br

2、l细胞与宫颈癌的发生发展可能存在着一定的关系。关键词宫颈癌调节B细胞Abstractobjective：TodetectthelevelsofBreginPBMCandIL-10andTGF-Bexpressioninseriaincervicalcarcinomapatients,forevaluatingthesignificanceofBregcellsincervicalclinicalmonitoring.Methods：Brlsubsetsinperipheralbloodweredetectedbyindirectimmunofluorescentstaini

3、ngandtheexpressionlevelofIL~10andTGF—BweredetectedbyELISAin50caseswithcervicalcarcinoma.ResuIts：TheproporticrnofBrlincreasedincomparisonwithnormalcontrol(P<0.05).TheexpressionlevelsofIL-10expressioninpatients，seriawerehigherthanthoseofcontrolgroups(P<0.05)；thelevelsofplasmaIL-10weresignifi

4、cantlyhigherinpatientswithinfiltrationascomparedwithpatientswithcontrolgroups(P<0.05).Conclusion：PredominantexpressionofIL-10incervicalcancerpatientssuggeststhatBrlcellsmayinvolveinthedevelopmentofcervicalcancer・KeyWordscervicalcarcinoma；development；Rreg宫颈癌是最常见的妇科肿瘤之一，其确切的病因仍未明确。普遍认为，高危性人乳

5、头瘤病毒(highriskhumanpap订lomavirus,hrHPV)的感染是导致宫颈癌的主要原因之一［1］。还有研究表明，宫颈癌的发生同时受其他因素影响,如患者细胞免疫功能低下［2］。新近研究提示，除分泌抗体的致病性B细胞外，还存在分泌IL-10或TGF-B等细胞因子的调节性B细胞(regulatoryBcells,Bregs),分别称为产生IL-10的Brl细胞或TGF-B1的Br3细胞［3,4］。Bregs通过产生抑制性细胞因子或分泌抑制性抗体影响其他免疫细胞的功能，减缓炎症症状。而慢性炎症又是肿瘤的主要诱发因素[5],Brl细胞及其分泌的IL-10可存在于多种

6、慢性炎症疾病，表明Brl细胞参与慢性炎症的病理机制。为了深入探讨Breg细胞亚型与宫颈癌的发生、发展之间的关系，本文针对不同病程的宫颈癌患者外周血Brl细胞亚群及血清中IL-10及TGF-B水平进行检测，以期找到Breg细胞亚型在宫颈癌诊断、治疗及预后中的作用。资料与方法主要试剂：兔抗人CD5抗体(FITC)和CD19抗体(PE)为Santa公司产品,IL-10及TGF-B的ELISA检测试剂盒为北京达科为生物技术有限公司产品。淋巴细胞分层液为sigma产品。临床资料及标本：2007年12月〜2010年12月宫颈癌患者外周血。所有患者术前均未做过放化疗，患者年龄25〜70岁

7、，平均47岁。根据1995年FIGO修订的临床分期标准50例标本中la期5例，lb期8例，IIa期13例，lib期20例，III期4例。组织分化程度：高分化7例，中分化20例，低分化23例。取同期子宫肌瘤切除的正常宫颈25例作为正常对照。实验方法：间接免疫荧光法：外周血lml,肝素抗凝。用淋巴细胞分层液分离单个核细胞，PBS洗2次，计数。取106个单个核细胞，分别加入抗CD5抗体和抗CD19抗体20111,将标本与抗体充分混匀后，30温育1小时。取出后用2ml红细胞裂解液裂解10分钟，离心后弃上清，用PBS洗2遍，