小麦抗叶锈近等基因系TcLr分子标记开发与凝集素类受体蛋白激酶基因的克隆.pdf

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1、分类号：密级：$435．121．43单位代码：学号：100862008390小麦抗叶锈近等基因系TcLr45分子标记开发与凝集素类受体蛋白激酶基因的克隆DevelopingMolecularMarkersandCloningtheLectin--likeReceptorKinasesGeneinWheatLeafRustSq"g"LinqTeLear-lsogenlcLineTcLr45学位申请人：刘春燕指导教师：闰红飞副教授刘大群教授学科专业：植物病理学学位类别：农学硕士授予单位：河北农业大学答辩日期：--O----年五月二十九日独创性声明本人声明所呈交的学位论文是本人在导师指导下进

2、行的研究工作及取得的研究成果。据我所知，除了文中特别加以标注和致谢的地方外，论文中不包含其他人已经发表或撰写过的研究成果，也不包含为获得塑兰鱼壅些盘堂或其他教育机构的学位或证书而使用过的材料。与我一同工作的同志对本研究所做的任何贡献均已在论文中作了明确的说明并表示谢意。学位论文作者签名：刘香燕签字日期：≯ff年6月2日学位论文版权使用授权书本学位论文作者完全了解塑兰垦壅些盘堂有关保留、使用学位论文的规定，有权保留并向国家有关部门或机构送交论文的复印件和磁盘，允许论文被查阅和借阅。本人授权塑兰堡盔些盘鲎可以将学位论文的全部或部分内容编入有关数据库进行检索，可以采用影印、缩印或扫描等复制手

3、段保存、汇编学位论文。(保密的学位论文在解密后适用本授权书)学位论文作者签名：刘否熹导师签名：签字日期：≥ofl年‘月2日签字日期：力f1年6月a日学位论文作者毕业后去向：工作单位：通讯地址：电话：邮编：摘要由小麦叶锈菌(PucciniatriticinaEriks．)引起的小麦叶锈病是影响世界小麦稳产高产的重要病害之一，也是影响我国小麦生产的重要因素。抗叶锈病基因的应用成为防治该病害最经济、有效的方法。小麦抗叶锈病基因Lr45来源于日本小黑麦，目前我国尚无关于克服该基因的叶锈菌株的报道，因此，Lr45为我国小麦叶锈菌有效的抗病基因，具有一定的应用潜力。本研究通过分子标记以及抗病相关基

4、因克隆的方法对小麦抗叶锈病基因Lr45进行研究，为该基因的分子鉴定以及抗病相关机制的研究奠定基础。本论文主要结果包括以下几个方面：1、利用定位在黑麦2R染色体的3个SSR标记、6个RAPD标记、1个STS标记以及小麦2A染色体上的4个EST-SSR标记、31个SSR标记筛选与Lr45连锁的分子标记，发现黑麦2R染色体上的SSR标记SCM43、SCM75和小麦2A染色体上的SSR标记WMC63在亲本TcLr45与Thatcher之间表现多态性。2、利用小麦抗叶锈病基因Lr25的SCAR标记Lr25F2呲5R19对同样来源于黑麦的小麦抗叶锈近等基因系TcLr26、TcLr45和Tch25以

5、及感病对照Thatcher进行检测，仅在TcLr45中扩增出一条1859bp的条带。经52个小麦抗叶锈近等基因系以及6个普通小麦、5个黑麦和3个小黑麦品种的验证，更正该标记为小麦抗叶锈近等基因系TcLr45特异的分子标记，命名为LR45R／F，遗传距离为14cM。避免了该标记今后在分子辅助选择中的错误使用。3、首次利用EST-CAPS技术对小麦抗叶锈近等基因系TcLr45及感病亲本Thatcher进行多态性分析。2A染色体短臂C．2AS5．0．78区域的25对EST引物中有2对引物在亲本之间扩增出差异，100个引物／酶切组合中有4组在TcⅢ5和Thatcher之间表现多态性。4、根据已

6、克隆的小麦抗叶锈病基因Lr34序列中的凝集素类受体蛋白激酶基因设计引物，在小麦抗叶锈近等基因系TcLr45的cDNA中扩增出单一条带，经克隆、测序，该序列为凝集素类受体蛋白激酶基因的部分片段。以该序列为靶序列进行RCAE．PCR，获得基因的cDNA全长片段为2347bp，共编码730个氨基酸。经SMART软件分析，该基因具有典型的凝集素类受体蛋白激酶结构，为L类型，将该基因命名为LecRK-LR45o关键词：小麦抗叶锈病基因；Lr45；黑麦；分子标记；EST-CAPS；凝集素类受体蛋白激酶基因DevelopingMolecularMarkersandCloningtheLectin-l

7、ikeReceptorKinasesGeneinWheatLeafRustNear-isogenicLineTcLr45Author：LiuChunyanMajor：PlantPathologySupervisors：AssociateprofessorYahHongfeiProfessorLiuDaqunAbstractLeafrust，causedbyPucciniatri6cinaEriks．，isoneofthemostseveredi