BCIP NBT碱性磷酸酶显色试剂盒.doc

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1、仅供科研使用版本号：BCIP/NBT碱性磷酸酶显色试剂盒【产品组成】ComponentSBJ-1049SStoreat试剂(A):AlkalinePhosphataseColorBuffer50ml4℃试剂(B):BCIPsolution(300×)175μl4℃,避光试剂(C):NBTsolution(150×)350μl4℃,避光【保存条件】4℃,避光,12个月。【产品概述】BCIP/NBT碱性磷酸酯酶显色试剂盒(BCIP/NBTAlkalinePhosphataseColorDevelopmentKit)是一种用于免

2、疫组化显色、Western等膜显色和诱导多功能干细胞iPS鉴定等的试剂盒。BCIP/NBT是碱性磷酸酯酶的常用底物，在碱性磷酸酯酶的催化下，BCIP会被水解产生强反应性的产物，该产物会和NBT发生反应，形成不溶性的深蓝色至蓝紫色的NBT-formazan。BCIP/NBTAlkalinePhosphataseColorDevelopmentKit可用于细胞或组织的碱性磷酸酯酶显色包括诱导多功能干细胞iPS的鉴定，也可用于Western等结合有碱性磷酸酯酶的膜的显色检测细胞或组织内源性的碱性磷酸酯酶显色。【使用方法】1、对

3、于组织切片或细胞样品或膜，在与碱性磷酸酯酶标记的抗体或其它形式的探针孵育后，用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。2、对于检测内源性碱性磷酸酯酶的组织或细胞样品，在适当固定后，也用适当洗涤液洗涤3～5次，每次3～5min。3、按照如下比例依次加入各溶液，混匀后即配制成BCIP/NBT染色工作液：名称规格规格AlkalinePhosphataseColorBuffer3ml10mlBCIPsolution(300×)10μl33μlNBTsolution(150×)20μl66μlBCIP/NBT染色工作液3.03ml

4、11ml4、洗涤完毕后，去除洗涤液。5、加入适量BCIP/NBT染色工作液，确保能充分覆盖样品。5、室温避光孵育5～30min或更长时间(可长达24小时)，直至显色至预期深浅。6、去除BCIP/NBT染色工作液，用蒸馏水洗涤1～2次即可终止显色反应。7、对于组织切片或细胞样品，显色反应终止后，如有必要可以用中性红染色液(neutralredstainingsolution)染色，以便于观察。对于膜，显色反应终止后，可以室温晾干避光保存。【注意事项】1、BCIP对人体有刺激性，NBT对人体有害，请注意适当防护。2、操作过程中

5、，尽量避免强光照射。3、为了您的安全和健康，请穿实验服并戴一次性手套操作。