环境毒理学实验教案.doc

《环境毒理学实验教案.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、青海大学生态环境工程学院环境毒理学实验报告科目：环境毒理学姓名：田成龙学号：1200602036实验一动物试验的一般操作技术一、目的与要求毒理学的许多试验研究，主要通过动物实验来进行。而实验过程中技术及生物材料的收集是否恰当，直接影响实验结果的质量。因此，毒理学实验工作者必须正确地掌握动物实验中的一般操作技术，这是保证试验工作成功的基本条件之一。本实验要求掌握动物的捉拿、固定、麻醉、编号、采血、处死方法和解剖检查。二、实验内容和方法（一）实验动物的捉拿和固定方法1、小鼠：捉拿时先用右手将鼠尾抓住提起，放在较粗糙的台面或鼠笼上，在其向前爬行时，右手向后拉尾，用左手拇指和食指抓住小鼠的两耳和头颈

2、部皮肤，将其固定于左手手心中，拉直四肢并用左手无名指压紧尾和后肢，右手即可作注射或其他实验操作。取尾血及尾静脉注射时，可将小鼠固定在金属或木制的固定器上。2、大鼠：大鼠抓取方法基本同小鼠，抓大鼠时若操作者不熟练，或者大鼠特别凶猛，操作者最好戴上防护手套(帆布或硬皮质均可)。如若是灌胃、腹腔注射、肌肉和皮下注射时，可采用与小鼠相同的手法，即拇、食指捏住鼠的耳朵及头颈皮肤，余下三指紧捏住背部皮肤，置于掌心中，调整大鼠在手中的姿势后即可操作。3、豚鼠：豚鼠性情温和，胆小易惊，一般不易伤人，抓取时，先用手掌扣住豚鼠背部，抓住其肩胛上方，拇、食指环握颈部，另一只手托住臀部。如果在实验时豚鼠频繁挣扎，不

3、宜采用此方法，因为操作者的拇、食指会随动物的挣扎越抓越紧而引起豚鼠窒息。另外，有时可用纱布将豚鼠头部轻轻盖住，操作人员轻扶住其背部或者让其头部钻到实验人员的臂下，然后进行实验操作。4、家兔：一手抓住兔颈部的被毛与皮肤，另一手托其臀部或腹部，使其躯干的重量大部分集中在手上。(二)实验动物的编号、标记和去毛方法1、编号和标记方法：在动物实验中，为了使实验动物个体间或组间区别开来，便于对每个实验动物的反应情况进行观察，必须对实验动物进行编号、标记。标记的方法很多，但基本原则是：号码清楚、耐久、简便、易认和适用。（1）临时性标记：染色法：染色法是用化学剂在动物身体明显部位如被毛、四肢等处进行涂染，或

4、用不同颜色等来区别各组动物，是实验室最常用、最容易掌握的方法。常用的标记溶液有：①3％-5％苦味酸溶液（黄色）；②0.5％中性红或品红溶液（红色）；③2％硝酸银溶液，(咖啡色，涂后需光照10min)；④煤焦油酒精溶液（黑色）；⑤龙胆紫溶液（紫色）。涂漆或贴胶布：用油漆在动物角或体表涂漆进行标记，或用胶布贴在动物腿或翅上进行标记，也都是效果较好的临时性标记方法。（2）半永久性标记：挂牌法：挂牌法可用来标记多种动物，并多数将塑料、铝或钢片制成的牌固定在实验动物耳朵内侧面上作为标记。一般用于兔、豚鼠标记。犬、猴、猫等动物有时可挂在颈部或笼箱或链条上。戴项圈法：先将号码冲压在圆形或方形铝或不锈钢制作

5、的金属牌上，长期使用不生锈。然后，将标有号码的金属薄片固定在拴动物的皮带圈上，将此圈固定在动物颈部。（3）针刺法：人工针刺号常用于兔的标记，先用手拔去兔耳的被毛，人工针刺号码，刺后涂以酒精黑墨即可。目前有市售的兔用打号器，原理与此相同，附带有不同数字和符号的针刺字号。可根据需要选用。字号安装在打号器上打号后，用黑墨涂在打号局部，数天后黑墨浸入皮下，显示出蓝黑色字号。一般来说，小型动物适宜用打耳孔法和染色法，中型动物适用挂牌法、针刺法和烙印法。（4）实验动物被毛的去除方法：动物被毛常影响实验操作和结果的观察，因此实验中常需去除或剪短动物的被毛。方法有四种：剪毛法：动物急性实验中常用此法。拔毛法

6、：兔耳缘静脉注射或取血时以及给大、小白鼠作尾静脉注射时常用此法（液体石蜡,凡士林）剃毛法：大动物作慢性手术时常用此法。脱毛法：一般大动物作无菌手术的术野准备或观察动物皮肤血液循环和病理变化时常采用此法。（三）实验动物的给药方法1、注射法给药：家兔耳缘静脉注射大、小鼠尾静脉注射。2、摄入法给药：家兔、大鼠、小鼠灌胃法。3、涂布法给药(四)实验动物的麻醉方法1、全身麻醉法：吸入法，注射法2、局部麻醉法：浸润麻醉，表面麻醉（五）实验动物各种体液的采集方法实验动物需要采集各种体液如血液、淋巴液、消化液、脑脊髓液、尿液、精液、阴道内液体等。下面是几种主要体液的采集方法。1、血液采集：（1）大、小鼠的采

7、血方法（2）兔的采血法2、尿液采集：常用尿液采集的方法有3种：①用代谢笼收集采尿，但易为粪便污染和尿蒸发，尿量不准确；②强制排尿法，按压两侧腰背部或轻压膀胱，如不成功可用细小导尿管或塑料管缓慢插入尿道至膀胱进行导尿；③采用无菌手术法，制造输尿管瘘和膀胱瘘，可长期采集尿液。（六）实验动物的处死措施1、蛙类：常用金属探针插入枕骨大孔，破坏脑脊髓的方法处死。操作过程中要防止毒腺分泌物射入实验者眼内。如被射入，必须立