支原体(mycoplasma)是一类没有细胞壁的原核细胞型微生.pdf

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1、精品文档第17章支原体支原体(mycoplasma)是一类没有细胞壁的原核细胞型微生物。细胞膜含固醇，能通过0.45m滤菌器;但呈二分裂繁殖，含DNA与RNA。支原体是目前所知能在无生命培养基中繁殖的最小微生物。过去曾称为类胸膜肺炎微生物(pleuropneumonia-likeorganism,PPLO),由于它们能形成有分枝的长丝，故称之为支原体。第一节概述支原体因其没有细胞壁故归属于柔膜体纲（Mollicute)的支原体目(Mycoplasmatales)。下分3个科：支原体科(Mycoplasmataceae);无胆甾原体科(Acho

2、leplasma-taceae),生长时不需要外源性胆固醇;螺原体科(Spiroplasmataceae),生长至一定阶段呈螺形。在支原体科中又分支原体(Mycoplasma)和脲原体(Ureaplama)2个属。支原体属现知有64个种，而脲原体属仅2个种。其中对人致病的主要为肺炎支原体（M.pneumoniae)、人型支原体(M.hominis)、生殖器支原体(M.genitalium)、穿透支原体(M.penetraus)和溶脲脲原体(U.urealyticum)。一、生物学性状形态与结构支原体是原核细胞生物中最小的，大小一般在0.2~0.3

3、m，很少超过1.0m。最外层是细胞膜，由蛋白质与脂质组成的三层结构。内、外二层主要是蛋白质，中间层为脂质。在脂质中固醇约占36%。凡能作用于固醇的物质，如二性霉素B、皂素、毛地黄苷等能引起支原体细胞膜的破坏而死亡。有的支原体在细胞膜外还有一层由多聚糖构成的荚膜，有毒性，是支原体的一种致病因素。支原体以二分裂繁殖为主，也见出芽、分枝或由球体延伸成长丝，然后分节段成为许多球状或短杆状的颗粒（图17-1）。1欢迎下载。精品文档图17-1有的支原体有一种特殊的顶端结构，能使支原体粘附在宿主上皮细胞表面。这与支原体在粘膜上的定植和致病有关。有些支原体能运

4、动，在支原体内有许多微丝组织成网，和运动有关。在前进方向微丝成束，向前突出。也有认为顶端结构在表面上呈交替粘附和释放，造成支原体在表面滑动。支原体无细胞壁，具有可塑性，能通过0.45m滤膜。支原体和其他原核生物一样，基因组是一个环状双链DNA。分子量较小，只有大肠埃希菌的1/5，故其合成和代谢很有限。支原体用普通染色不易着色，用Giemsa法染色着色很浅。革兰染色阴性。培养特性支原体的营养要求比一般细菌高。除无胆甾原体外，培养基中必须加入10%~20%人或动物血清。血清主要用于提供固醇和其他长链脂肪酸，不但是细胞膜合成需要，且具稳定细胞膜的作用。

5、支原体一般在pH7.8~8.0间生长，低于7.0则死亡。但溶脲脲原体最适的pH为6.0~6.5，因在培养时溶脲脲原体分解尿素产氨，可使培养基pH升高。当培养基指示剂变色即需移种，否则将迅速死亡。支原体一般为兼性厌氧，仅个别菌株专性厌氧。支原体生长缓慢，在含1.4%琼脂的固体培养基上孵育2~3d（有的需要2周）后出现菌落。典型的菌落呈荷包蛋样，核心较厚，向下长入培养基，周边为一层薄薄的透明颗粒区（图17-2）。有的整个菌落呈颗粒状。肺炎支原体的菌落较大，直径100~150m。溶脲脲原体的菌落最小，仅10~40m，故曾称“T”株(tinystrai

6、n)。支原体的菌落小，宜在低倍镜下观察。图17-2在液体培养基中支原体的生长量较少，且个体小，一般不易见到混浊，只有小颗粒沉于管底。溶脲脲原体在生长量最2欢迎下载。精品文档大时每ml不超过106~107个菌落形成单位（CFU），故液体清亮。支原体在固体和液体培养基中生长达高峰后，若继续培养，则很快死亡。在低温下可延长存活时间。支原体是污染细胞培养的一个重要因素，支原体在细胞培养中不一定都引起细胞病变，但可影响这些细胞用于病毒培养。生化反应支原体可根据是否能利用葡萄糖、水解精氨酸和尿素来进行鉴别。表17-1人类主要支原体生物学性状支原体葡萄糖精氨酸尿

7、素吸附细胞致病性肺炎支原体+——红细胞肺炎、支气管炎人型支原体—+——泌尿生殖道感染生殖器支原体+———泌尿生殖道感染穿透支原体++—红细胞、多见于艾滋病CD4+T细胞、巨噬细胞溶脲脲原体——+—泌尿生殖道感染抗原结构支原体细胞膜上的抗原结构由蛋白质和糖脂组成。各种支原体均有其特有的抗原结构，交叉较少，在鉴定支原体时有重要意义。补体结合试验取决于抗原的糖脂部分，ELISA试验取决于抗原的蛋白质部分。支原体的血清抗体可用作生长抑制试验(growthinhibitiontest,GIT)和代谢抑制试验（metabolicinhibitontest,MI

8、T),特3欢迎下载。精品文档异性与敏感性均高。GIT试验的操作步骤与药敏试验的纸片法相似，将沾有特异性抗血清纸片贴于划有支