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1、支原体Mycoplasma*1.0teachinghr第18章第一节概述概念:是一类缺乏细胞壁,呈多形性能通过除菌滤器,能在无生命培养基中独立生长繁殖形成有分支长丝的最小原核细胞型微生物。柔膜体纲支原体目肺炎支原体,人型支原体,生殖支原体,穿透支原体,发酵支原体,梨支原体溶脲脲原体支原体分类支原体科无胆甾原体科螺原体科支原体属脲原体属一、生物学性状(一)形态:原核生物中最小(0.3~0.5μm)无细胞壁,高度多形性:球,杆,丝状和分枝状等,G-,不易着色,一般Giemsa染色较好,染为淡紫色(二)结构细
2、胞膜内外两层为蛋白质及糖类,中层为脂类(磷脂为主,固醇占36%),凡作用于胆固醇的物质,如皂素,毛地黄甙,二性霉素B等均能破坏细胞膜致其死亡。特殊的顶端结构:粘附宿主上皮细胞表面,与支原体的致病有关。(三)培养特性营养丰富的培养基:10%~20%人或动物血清以提供胆固醇与其它长链脂肪酸,多数还需添加酵母浸液,组织浸液,核酸提取物和辅酶。pH:适宜7.6~8.0(<7.0易死亡),但解脲脲原体最适pH5.5~6.5兼性厌氧:大多寄生性支原体在37℃时在微氧环境(含5%CO2和90%N2)中生长最佳。繁殖方
3、式多样:二分裂繁殖外,还有分节,断裂,出芽或分枝等方式固体培养基:2~7天长出典型的“荷包蛋样”菌落.菌落极小直径约10~600μm.低倍镜下见菌落呈圆形,心致密隆起,深入琼脂,外周由颗粒包绕。需用放大镜/低倍显微镜观察支原体典型菌落鉴别点支原体细菌L型细胞壁缺失原因在遗传上与细菌无关与原菌相关,可以回复细胞膜含高浓度固醇细胞膜不含固醇培养特性需要胆固醇大多需要高渗培养菌落大小生长慢,菌落小菌落稍大(0.6~1.0)液体培养液体培养混浊度极低有一定混浊度,可附壁支原体与细菌L型的异同点不同点固体培养—菌
4、落呈荷包蛋样或颗粒状。缺乏细胞壁,形态多样,能通过滤菌器。临床表现相似—间质性肺炎、泌尿生殖道感染、不育等相同点支原体葡萄糖精氨酸尿素吸附细胞致病性肺炎支原体+——红细胞肺炎、支气管炎人型支原体—+——泌尿生殖道感染生殖器支原体+———泌尿生殖道感染穿透支原体++—红细胞条件感染CD4+T细胞多见于艾滋病巨噬细胞溶脲脲原体——+—泌尿生殖道感染流产及不孕不育生化反应(四)抗原结构补体结合试验可检测糖脂类抗原;ELISA试验可检测蛋白质类抗原;血清抗体可用生长抑制试验(GIT,growthinhibiti
5、ontest)和代谢抑制试验(MIT,metabolicinhibitiontest)以鉴定.(五)抵抗力对化学消毒剂敏感,对结晶紫、醋酸铊、亚碲酸钾有抵抗力;对影响细胞壁合成的抗生素如青霉素类天然耐受,但对干扰蛋白质合成的抗生素如强力霉素、交沙霉素等敏感。二、致病性与免疫性(一)致病机制荚膜或微荚膜:抗吞噬作用毒性代谢产物:神经毒素、磷脂酶C、核酸酶、过氧化氢和超氧离离子均能引起宿主黏膜上皮细胞或红细胞的病理损伤超抗原:免疫调节其它:如穿透支原体粘附侵入CD4+T细胞引起损伤粘附素:粘附呼吸道或泌尿生
6、殖道上皮细胞(二)所致疾病存在广泛,多不致病;是污染细胞培养的重要因素肺炎支原体引起原发性非典型性肺炎;溶脲脲原体、人型支原体和生殖支原体可引起泌尿生殖系统感染和不育症;穿透支原体和发酵支原体为艾滋病的辅助致病因素(三)免疫性体液免疫:抗膜蛋白的抗体包括IgM,IgG和SIgA细胞免疫:主要是特异性CD4+Th1,细胞分泌细胞因子0.2~0.3μm,高度多形性,如球形,球杆状,棒状,分枝状和丝状;初次分离应在含血清和新鲜酵母浸出液的培养基中,一般10天左右长出菌落;多次传代后生长加快,菌落呈“油煎蛋”状
7、;能发酵葡萄糖,不能利用精氨酸与尿素;对美蓝,醋酸铊,青霉素不敏感。第二节肺炎支原体一、生物学性状肺炎支原体形态肺炎支原体油煎蛋菌落(一)致病性1.主要经飞沫传播,但大多数发生于夏末秋初,5~15岁青少年发病率最高。2.含特殊的顶端结构:P1表面蛋白(170kDa)和P30(32kDa)为主要的粘附蛋白,使肺炎支原体黏附于呼吸道上皮。3.肺炎支原体具有超抗原作用,能刺激炎症细胞在感染部位释放大量的淋巴因子(如TNF-α、IL-1、IL-6)引起组织损伤。二、致病性与免疫性(二)所致疾病原发性非典型性肺炎
8、(primaryatypicalpneumonia),临床以咳嗽,发热,头痛,咽痛和肌肉痛为主,有时并发支气管肺炎,皮疹、心血管和神经系统症状。(三)免疫性血清特异性IgM、IgG及SIgA和致敏的淋巴细胞;呼吸道局部黏膜产生的SIgA对防止再感染有较强保护作用;出现IgE介导的I型超敏反应,促使哮喘病急性发作(一)分离培养痰或咽拭子接种在SP-4培养基,挑选可疑菌落,经形态学、糖发酵、溶血性、血细胞吸附试验进行初步鉴定,进一步鉴定需用特异