分析样品制备新技术—固相萃取课件.ppt

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1、分析样品制备新技术—固相萃取农药残留分析与检测李广领资源与环境学院FieldSampleConcentrationHomogenateExtractedLaboratorysample农药残留色谱分析样品的制备（以果蔬样品为例）CleaningupAnalyticalSampleSamplepreprocessing一、固相萃取技术概述Solid-PhaseExtraction，SPESPE是指液体样品中的分析物通过吸附作用，被保留在吸附剂上，然后用适当的溶剂洗脱的过程。最早由Breiter于1976

2、年提出，主要用于人体体液中药物残留提取，始称“柱提取”，后扩展至水样农药残留提取和净化，并称为“固相萃取”，目前越来越多地应用于液体样品中残留农药分析样品的制备。二、固相萃取技术的基本原理SPE可看作是一个液相色谱过程，吸附剂为固定相，洗脱溶剂为流动相，利用吸附剂对农药和杂质吸附能力的差异所产生的选择性保留，对样品进行提取和净化。这种保留可以通过改变吸附剂类型、洗脱剂类型、洗脱剂体积和离子强度等来满足分析需要。三、固相萃取装置SPE装置由SPE小柱、主机和辅件构成。SPE小柱包括柱管、烧结垫和吸附剂（

3、柱床）三部分；SPE辅件一般有真空系统、大容量采样器和缓冲瓶。四、固相萃取的基本操作程序（1）柱活化（Condition）目的是除去吸附剂中可能存在的杂质和使填料溶剂化，以提高萃取的重现性。非极性柱活化溶剂为易溶于水的甲醇、乙腈、丙酮等，通常还要用水洗去残留在柱上的有机溶剂；极性柱可采用氯仿、苯、石油醚、乙醚等非极性溶剂处理。（2）上样（LoadSample）加试样于SPE柱上，用5~10倍柱床体积的溶剂清洗。在该步骤，分析物及杂质被保留在吸附剂上为防止分析物流失，试样溶剂强度不宜过高。（3）淋洗杂质

4、（Wash）一般用中等强度的溶剂，将干扰组分洗脱下来。（4）目标物洗脱（Elution）加试样于SPE柱，用合适的溶剂淋洗，收集并分析流出液，得洗脱溶剂体积对分析物的洗脱曲线，确定合适的洗脱剂强度和体积。将分析物完全洗脱并以最小洗脱液体积收集。注意：强溶剂能使分析物快速洗脱并以最小体积收集，但会有较多强保留性杂质。用弱溶剂洗脱时，所收集分析物组分体积可能较大，但含杂质较少。五、固相萃取中的两个重要概念1、吸附容量——单位质量吸附剂所能吸附有机物的总质量。现在使用的固相吸附剂大都有500μg/g以上的吸

5、附容量。2、穿透体积——上样后，SPE柱出口流出的样品溶液中能检测到目标物的上样体积。一般意义上，在穿透体积以内，样品中待分析物均被SPE吸附；穿透体积以上，则样品中的待分析物部分被吸附，直至完全不被吸附。它是确定上样体积和衡量浓缩能力的重要参数！样品穿透体积的测算：穿透体积可通过测定穿透曲线确定。先测定已知含量的痕量浓度标准溶液的紫外吸收强度（A0），然后用该溶液过柱，按一定体积间隔连续测定滤液的紫外吸收强度（A）；最后以滤液体积为横坐标，以紫外吸收强度比（A/A0）为纵坐标作图。当强度比为0.01

6、时的滤液体积称为初始穿透体积，为0.99时的滤液体积被认为是最大穿透体积，即待检目标物全部流出。穿透曲线测定的实例——西玛津、阿特拉津和利谷隆在C18柱上的穿透曲线测定：用100μg/L的标准液测定了西玛津、阿特拉津和利谷隆三种农药在C18-SPE柱上的穿透曲线如下图所示。由图可以看出，穿透曲线是一条“S曲线”，不同的农药曲线不同——穿透体积越大，曲线跨度越大。穿透体积的实际指导意义：例如：估计某水样中甲胺磷含量在0.05μg/mL以下，仪器检测限为25ng，甲胺磷水溶液对360mgC18柱的穿透体积

7、为1.2mL，可以知道，上样体积只能在1.2mL以下，超过这个量就会有甲胺磷流失，而要达到检测限，0.5mL的水样就足够了。评估萃取中的问题评估分析的要求浓缩的要求样品稀释、方法检测灵敏度纯度的要求检测方法、可能的干扰溶剂的要求检测方法接受的水溶性或非水溶性洗脱液样品特性分析物分子量、官能团、极性、溶解性等干扰物分子量、官能团、极性、溶解性等样品基液液态、固态，以及基液中可能存在的干扰物建立初步的SPE方法六、固相萃取方法的建立与优化SPE方法优化用标准溶液检验分析物从柱子洗脱的情况选择萃取方法选择萃

8、取材料选择洗脱溶剂选择样品体积用没有基质的标准溶液进行萃取试验检验从基质中萃取分析物的情况检验干扰物是否与分析物同时被洗脱是否否否是是方法的确认初步SPE方法小结与讨论：1、SPE是取代“液液提取”的新技术，提取、净化、浓缩同步进行，与传统的液液萃取相比，不仅可以有效地将分析物与干扰组分分离，有效减化样品前处理程序，操作简单、省时省力，而且大大提高了分析物的回收率。2、农药残留分析中固相萃取可以是持留农药在柱子中，用溶剂洗脱后进行分析；也可以是持留样品杂