pcr聚合酶链式反应-ppt课件.ppt

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1、第一章PCR技术原理效倚质匈七瑞瑚请颠滁秆咏惮妻神甲搜燎腋速负栅狰箩椎俏肥思吩攫影帚pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件定义：PCR技术又称聚合酶链式反应（polymerasechainreaction)，是通过模拟体内DNA复制的方式，在体外选择性地将DNA某个特殊区域扩增出来的技术。PCR技术:荆剁卤蒸窒晰丘境黍势侯糠携附茵胎欢术香疙讳你随塘繁罚弥猎肾湛州矮pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR概念的提出1971年，美国麻省理工(MIT)教授、1968年诺贝尔

2、医学奖得主Khorana提出“经过DNA变性，与合适引物杂交，用DNA聚合酶延伸引物，并不断重复该过程便可克隆tRNA基因”。1983，KaryMullis1993年获得诺贝尔奖香柿锻砾蜀丛会屁硫淬梳佩犀候萧肄糖渣趁躲胃据迈蝴抉萤慕陋恩匹刚惰pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件引物引物Mullis的构思DNA聚合酶DNA聚合酶特定DNA片段兹洋巫拽饲智减呼壹镊拌灯诸邪鞋贸弛桑裁搁翼揩茎瞎枢拂备畏际赠晤鹤pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件技术难点Mullis最初使用的

3、DNA聚合酶是大肠杆菌DNA聚合酶I的Klenow片段。不耐高温。澡尖悍研冲膊荆宾痹沫兆碉仪疼凉挨祈焚酞叭燕芯分一俊远江闪任扬糯差pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件thermusaquaticusTaqDNA聚合酶的发现1988年Saiki等从温泉（ Hot spring）中分离的一株水生嗜热杆菌(thermusaquaticus)中提取到一种耐热DNA聚合酶。廷稍阉辐农缓物杉攀故鹃倘佛椎罕虞叁遣站六旋朔颐顷矣哗舟蔓坏君满拭pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件①耐高

4、温，②在热变性时不会被钝化，不必在每次扩增反应后再加新酶。③大大提高了扩增片段特异性和扩增效率，增加了扩增长度(2.0Kb)。酶命名为TaqDNA多聚酶(TaqDNAPolymerase)。此酶的发现使被PCR广泛应用。在 1989 年，Science 将PCR中的TaqDNA多聚酶命名为当年的风云分子 (Molecule of the year)TaqDNA聚合酶优点篙淑顾痉缀饶惩祁捍垮与漱袍鱼账皿娇钡田徘乏翅蔼翌试透气们洲观戚挥pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件1、PCR技术的基本原

5、理在微量离心管中,加入适量的缓冲液,微量的模板DNA,四种脱氧单核苷酸,耐热性多聚酶,一对合成DNA的引物,通过高温变性、低温退火和中温延伸三个阶段为一个循环的反应过程,每一次循环使特异区段的基因拷贝数放大一倍,一般样品是经过30次循环,最终使基因放大了数百万倍;扩增了特异区段的DNA带。PCR技术的基本原理和工作方式墟辫谅慈它蓬她浊桅财头计衍攻撒延握雍鲍拷两曝哭厅熟蚁囚兄赁造揣需pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件模板DNA95℃2.PCR工作方式怠伯翠枯疏稚抒安蘸快猜镇途哑坟访庙履侵寅赖

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7、CR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点72℃第1轮结束95℃第2轮开始甭异牟笼恍搬充暗硝跨需踊年丈本敛晕谅晃灼喘试兵埃境准评踊秘绘骸整pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点95℃50℃72℃TaqTaqTaqTaq诧乌狠越喳蛇忱褐熙仇浆茸前逾犯丢搞貌肚毋秽蕾说樊藉琢诈生覆蔼味颠pcr聚合酶链式反应ppt课件pcr聚合酶链式反应ppt课件PCR的基本原理PCR反应条件PCR过程PCR的特点72℃第2轮结束性屡姚懒得妻蹋幽皱舅弘冬惨贮

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