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1、质粒提取试剂配制和操作步骤试剂配制(小量)1.1M（M代表摩尔浓度即mol∕L）NaOH(400ml):分子量为40，秤取16gNaOH,溶于400mlDDW中。2.2MTris-HCl(500ml):分子量为121.14,秤取121.14gTris,放入干净的500ml烧杯中，加400mlDDW，置于搅拌器上搅拌溶解，用HCl调节pH值为8.0（首先直接加12M的浓盐酸约20ml，接近8.0时再用1MHCl调节）,定容至500ml，4℃保存。3.10%SDS(200ml):称量20gSDS,放入干净的烧杯中，
2、加100mlDDW，定容到200ml，室温保存。（SDS具有较强的刺激性，称量时一定带好口罩，动作轻柔）。4.BufferP1(500ml):用50ml离心管量取10ml0.5M的EDTA，然后量取12.5ml2M的Tris-HCl，放入干净的烧杯中，加入300mlDDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用HCl调节pH值为8.0（大约加12M的浓盐酸1ml），定容至500ml，4℃保存。5.BufferP2（100ml）:20ml1MNaOH和10ml10%SDS放入200ml的玻璃瓶中，然后加入70mlDDW，混匀，
3、室温放置过夜，使其自溶，最后室温保存。(注：不需要定容，严格按步骤操作)。6.BufferP3(500ml)：秤取147.21g乙酸钾，溶于300mlDDW中，置于搅拌器上搅拌溶解，用冰醋酸调节pH值为5.5，（约加80–100ml冰醋酸）,定容至500ml，4℃保存。7.BufferQBT（500ml）：分别称取NaCl21.915g,MoPS5.23g,放于干净的500ml烧杯中，加入300mlDDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用1MNaOH调节pH值为7.0（约加10–15mlNaOH）,然后加入75ml异丙
4、醇，定容至500ml，4℃保存。8.BufferQC（500ml）：分别称取NaCl29.22g,MoPS5.23g,放于干净的500ml烧杯中，加入300mlDDW,置于搅拌器上搅拌溶解，用1MNaOH调节pH值为7.0（约加9mlNaOH,然后加入75ml异丙醇，定容至500ml，4℃保存。9.BufferQF（500ml）：称取NaCl36.525g,量取2MTris-HCl12.5ml,放于干净的500ml烧杯中，加入300mlDDW，置于搅拌器上搅拌溶解，用1MNaOH调节pH值为8.5（约加0.1m
5、lNaOH），然后加入75ml异丙醇，定容至500ml，4℃保存。10.配制RNase:(1)将RNase粉末溶于10mM的乙酸钾（即BufferP3），配制成浓度为10mg/ml的溶液。(2)将配好的RNase溶液100℃加热10min,随后冷却至室温。(3)用1M的Tris-HCl调节pH值至7.4，大约需要0.1体积的Tris-HCl。(4)分装RNase溶液于1.5mlEP管中，-20℃保存。试剂配制(大量)1.1MNaOH(400ml):分子量为40，秤取16gNaOH,溶于400mlDDW中。2.2
6、MTris-HCl(500ml):分子量为121.14,秤取121.14gTris,溶于400mlDDW中，用HCl调节pH值为8.0,定容至500ml。3.BufferP2（1000ml）:称取10gSDS,放入1000ml的玻璃瓶中，然后加入750mlDDW，最后加入200ml1M的NaOH，混匀，室温放置过夜，使其自溶。(注：不需要定容，严格按步骤操作。)4.BufferP1(1000ml):用50ml离心管量取20ml0.5M的EDTA，然后量取25ml2M的Tris-HCl，加入700mlDDW,用H
7、Cl调节pH值为8.0，定容至1000ml。5.BufferP3(1000ml)：秤取294.42g乙酸钾，溶于800mlDDW中，用冰醋酸调节pH值为5.5，定容至1000ml。6.BufferQBT（1000ml）：分别称取NaCl43.83g,MoPS10.46g,加入600mlDDW,用NaOH调节pH值为7.0，然后加入150ml异丙醇，定容至1000ml。7.BufferQC（1000ml）：分别称取NaCl58.44g,MoPS10.46g,加入600mlDDW,用NaOH调节pH值为7.0，然后
8、加入150ml异丙醇，定容至1000ml。8.BufferQF（1000ml）：称取NaCl73.05g,量取2MTris-HCl25ml,加入800mlDDW，用NaOH调节pH值为8.5，然后加入150ml异丙醇，定容至1000ml。9.配制RNase:(1)将RNase粉末溶于10mM的乙酸钾（即BufferP3），配制成浓度为10mg/ml的溶液。(2)将配好的RNase溶液1
