邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法.doc

《邻二氮菲吸光光度法测定铁实验操作方法.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、实验仪器一：紫外-可见分光光度计的使用邻二氮菲吸光光度法测定铁一、实验目的1.初步熟悉分光光度计的使用方法。2.熟悉测绘吸收光谱的一般方法。3.学习标准曲线定量方法。二、实验原理在建立一个新的吸收光谱法时，必须进行一系列条件试验，包括显色化合物的吸收光谱曲线（简称吸收光谱）的绘制、选择合适的测定波长、显色剂浓度和溶液pH值的选择及显色化合物影响等。此外，还要研究显色化合物符合朗伯－比尔定律的浓度范围、干扰离子的影响及其排除的方法等。本实验利用分光光度计能连续变换波长的性能，测定邻二氮菲－Fe2+的吸收光谱，并选择合适的测定波长。在pH=3～9的溶液中，Fe2+与邻二氮菲（phe

2、n）生成稳定的橙红色络合物，λmax＝508nm,ε＝1.1×104L/（mol·cm），lgβ3=21.3(20℃)（橙红色）Fe3+与邻二氮菲生成1：3的淡蓝色络合物（lgβ3=14.1），故显色前应先用盐酸羟胺将Fe3+还原为Fe2+，其反应为在508nm处测定吸光度值，用标准曲线法可求得水样中Fe2＋的含量。若用盐酸羟胺等还原剂将水中Fe3＋还原为Fe2＋，则本法可测定水中总铁、Fe2＋和Fe3＋各自的含量。三、仪器与试剂1．仪器722型分光光度计、酸度计、容量瓶（50mL）、吸量管（5mL，10mL）等。2．试剂（1）铁标准溶液准确称取0.2152克优级纯铁铵矾（NH

3、4Fe（SO4)2·12H2O）于小烧杯中，加水溶解，加入6mol∕LHCl溶液5mL，定量转移至250mL容量瓶中稀释至刻度，摇匀。所得溶液每毫升含铁0.100mg（即100ug/mL）。（2）0.15％邻二氮菲（又称邻菲咯琳）水溶液：称取1.5g邻二氮菲，先用5～10mL95％乙醇溶解，再用蒸馏水稀释到1000mL。（3）10％盐酸羟胺水溶液（新鲜配制）；（4）HAc－NaAc缓冲溶液（pH＝4.6）：称取136g优级纯醋酸钠，加120mL冰醋酸，加水溶解后，稀释到500mL。（5）0.1mol∕LNaOH溶液（6）0.1mol∕LHCL溶液四、实验步骤(一)实验条件的选择

4、1．吸收曲线的制作和测量波长的选择：用吸量管吸取0.0，1.0mL铁标准溶液（100μg/ml），分别注入两个50mL比色管中，各加入1mL盐酸羟胺溶液，2mL邻二氮菲，5mLHAc-NaAc，用水稀释至刻度，摇匀。放置10min后，用1cm比色皿，以试剂空白（即0.0mL铁标准溶液）为参比溶液，在440～560nm之间，每隔10nm测一次吸光度，在最大吸收峰附近，每隔5nm测定一次吸光度。在坐标纸上，以波长λ为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制A和λ关系的吸收曲线。从吸收曲线上选择测定Fe的适宜波长，一般选用最大吸收波长λmax。2．酸度影响于8只50mL容量瓶（或比色皿）中，

5、用刻度移液管各加入1.0mL100μg/ml的铁标准溶液，再加入1mL盐酸羟胺溶液和2mL邻二氮菲溶液，摇匀。然后分别加入NaOH溶液0.0mL、0.2mL、0.5mL、1.0mL、1.5mL、2.0mL、2.5mL、3.0mL。用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10min后分别测定各溶液的pH值和吸光度。吸光度测定条件为：1cm比色皿，蒸馏水作参比，测定波长为λmax。3．显色剂用量的影响取7个50mL容量瓶（或比色皿），依次加入1.0mL100μg/ml的铁标准溶液，1mL盐酸羟胺溶液摇匀。再分别加入邻二氮菲溶液0.1mL、0.3mL、0.5mL、0.8mL、1.0mL、2.0

6、mL、4.0mL，加入5.0ml的HAc－NaAc，用蒸馏水稀释至刻度，摇匀。放置10min后测定各溶液的吸光度。吸光度测定条件为：1cm比色皿，以蒸馏水作参比，测定波长为λmax。（二）铁含量的测定1．标准曲线的制作：用移液管吸取100μg·mL-1铁标准溶液10mL于100mL容量瓶中，加入2mL6mol·L-1的HCl，用水稀释至刻度，摇匀。此溶液每毫升含Fe3+10μg。在6个50mL容量瓶（或比色管）中，用吸量管分别加入0.0,2.0,4.0,6.0,8.0,10.0mL10μg·mL-1铁标准溶液，分别加入1mL盐酸羟胺，2mLPhen，5mLHAc－NaAc溶液

7、，每加一种试剂后摇匀。然后，用水稀释至刻度，摇匀后放置10min。用1cm比色皿，以试剂为空白（即0.0mL铁标准溶液），在所选择的波长下，测量各溶液的吸光度。以含铁量为横坐标，吸光度A为纵坐标，绘制标准曲线。用绘制的标准曲线，重新查出相应铁浓度的吸光度，计算Fe2+－Phen络合物的摩尔吸光系数。2．试样中铁的测定准确吸取适量试液于50ml比色管中，按标准曲线的制作步骤，加入各种试剂，测量吸光度。从标准曲线上查出和计算试液中铁的含量（μg·mL-1）。五、数据记录与处理1．绘制A-λ，得