DEPC水的配置及保存.pdf

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1、DEPC水是用DEPC(diethypyrocarbonate，焦碳酸二乙酯)处理过并经高温高压消毒的MiliQ纯水。经检测不含RNase、DNase和proteinase。DEPC水可以用于RNA沉淀的溶解，含有RNA的各种反应体系如反转录、siRNA的退火等，以及其它各种要求无RNase、DNase和proteinase的反应体系。DEPC水一般是指千分之一浓度的DEPC,在搅拌器上搅拌至完全溶解，即看不到“油珠”为止，用来处理枪头、EP管的DEPC水不需高压灭活，而用于配制DEPC酒精等试剂和用来这种RNA相关试验的DEP

2、C水需灭火后使用。DEPC气味芳香浓烈，强挥发性，有毒，需在通风橱中操作。方法是：取市售DEPC1ml，加入1L待处理水（蒸馏水等）中，经猛烈振摇后，于室温静止数小时，然后高压灭菌，以除去降解DEPC（DEPC分解为CO2和乙醇）。有些试剂可直接加入DEPC，终浓度一般为0.1%～0.4%，原则上在杂交及其以前的步骤中，所有液体试剂均需用DEPC处理，或用DEPC水配制，包括乙醇的稀释。此外，接触标本以及标本有关的空中的洗涤也需DEPC水洗涤。注意：①DEPC是潜在的致癌物质，在操作中应尽量在通风的条件下进行，并避免接触皮肤。②

3、含有Tris缓冲液的溶液中，不能加入DEPC。去离子纯净水加入DEPC达浓度0.1%，室温下持续搅拌过夜，分瓶包装后湿热高压灭菌彻底挥发去除DEPC后可以长期保存在室温或4度冰箱，不宜反复使用。