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1、专题2 微生物的利用考纲要求三年考情1.微生物的分离和培养2.某种微生物数量的测定3.培养基对微生物的选择作用4.利用微生物发酵来生产特定的产物以及微生物在其他方面的应用2012北京,2012山东,2011山东,2011新课标全国卷,2010山东一、微生物的实验室培养1.培养基(1)概念:人们按照微生物对_________的不同需求,配制出供其_________的营养基质。(2)营养构成:一般都含有_______________和无机盐。此外还需要满足微生物生长对___、氧气以及_____________的要求。(3)种类:按照物理性质可分为_____培养基和固体培养基。营养物质生
2、长繁殖水、碳源、氮源特殊营养物质液体pH2.无菌技术(1)含义:指在培养微生物的操作中,所有防止_________的方法。(2)关键:防止_________的入侵。(3)不同对象的无菌操作方法(连线):杂菌污染外来杂菌3.大肠杆菌的纯化培养(1)制备牛肉膏蛋白胨固体培养基:计算_____溶化____________称量灭菌倒平板(2)纯化大肠杆菌的方法:①纯化培养原理:想方设法在培养基上得到由一个细胞繁殖而来的肉眼可见的菌落,即可获得较纯的菌种。②纯化大肠杆菌的关键步骤:_____。③常用的微生物接种方法有两种:a.平板划线法:是通过接种环在琼脂固体培养基表面___________
3、_____,将聚集的菌种逐步稀释分散到培养基的表面。b.稀释涂布平板法:是将菌液进行一系列的_________,然后将___________的菌液分别涂布到琼脂固体培养基的表面,进行培养。接种连续划线的操作梯度稀释不同稀释度(3)菌种的保存方法:①对于频繁使用的菌种,可以采用_________的方法。②对于需要长期保存的菌种,可以采用_________的方法。临时保藏甘油管藏二、土壤中分解尿素的细菌的分离与计数1.分离原理土壤中细菌之所以能分解尿素,是因为它们能合成_____,这种物质在把尿素分解成无机物的过程中起到_____作用。2.统计菌落数目统计样品中的活菌一般用______
4、_______法。3.实验流程土壤取样→___________→微生物的培养与观察→细菌的_____。脲酶催化稀释涂布平板样品的稀释计数三、分解纤维素的微生物的分离1.纤维素酶(1)组成:纤维素酶是一种_______,一般认为它至少包括三种组分,即______________________。(2)作用:纤维素________________C1酶CX酶葡萄糖苷酶复合酶C1酶、CX酶和葡萄糖苷酶纤维二糖葡萄糖2.纤维素分解菌的筛选(1)原理: 纤维素分解菌(2)筛选方法:_______染色法,即通过是否产生_______来筛选纤维素分解菌。(3)培养基:以_______为
5、唯一碳源的选择培养基。刚果红纤维素___________红色消失,出现_______纤维素酶红色复合物透明圈刚果红透明圈纤维素(4)实验流程:土壤取样:富含_______的环境↓选择培养:用___________培养,以增加纤维素分解菌的浓度↓_________:制备系列稀释液↓涂布平板:将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上↓挑选产生_______的菌落纤维素选择培养基梯度稀释透明圈1.(2012北京T5C)将转基因植物的叶片接种到无菌培养基上,应该进行严格的无菌操作。()【分析】植物组织培养技术成功的关键就是保证无菌条件,如果接种时不进行严格的无菌操作,可能导致实验失败。2.(
6、2012北京T5D)将土壤浸出液涂布在无菌的选择培养基上分离分解尿素的细菌,是否无菌操作影响较小。()【分析】土壤浸出液中含有多种杂菌,所以利用选择培养基筛选土壤浸出液中特定微生物时,不需要进行严格的无菌操作。√√3.培养基中一般都含有水、碳源、氮源和无机盐四种成分。()【分析】培养基是根据培养微生物的需求配制的,微生物都需要水、碳源、氮源和无机盐四种营养成分。4.筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源。()【分析】分解尿素的细菌能合成脲酶,脲酶能催化分解尿素,所以筛选分解尿素的细菌应以尿素作为培养基中的惟一氮源。√√5.土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是必不
7、可少的。()【分析】土壤中纤维素分解菌的筛选流程中的“选择培养”是否需要,应根据样品中目的菌株数量的多少来确定。6.在以纤维素为唯一碳源的培养基中加入刚果红染色剂,若出现透明圈,则说明筛选到分解纤维素的细菌。()【分析】刚果红染色剂能与纤维素结合发生颜色反应,形成红色复合物。分解纤维素的细菌产生纤维素酶分解纤维素,在分解纤维素的细菌的周围出现透明圈。×√7.统计样品中的活菌一般使用平板划线法。()【分析】使用平板划线法能分离微生物,但不能对微生物进行计数。×考点一培养
