实验二 血乳酸的测定及其应用.ppt

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1、实验二血乳酸的测定及其应用通过实验使学生掌握体内血乳酸的测定方法及掌握血乳酸指标在运动实践中的应用和意义，为体育教学和运动训练提供指导。巩固离心机、可调微量移液器等仪器的基本操作。掌握实验对象取材、标本处理的方法与生化分析仪的操作方法。一、实验目的以NAD+为氢受体，LDH催化乳酸脱氢生成丙酮酸，使NAD+转化成NADH。其中PMS递氢使NBT还原为紫色呈色物，呈色物的吸光度在530nm时与乳酸含量成线性关系。二、实验原理三、实验器材与试剂3实验器材与试剂⑴实验仪器1.实验仪器采血针、吸血管、移液管、水浴锅、离心机、生化分析仪等2.试剂盒（南京建成生物工程研究所）四、实验步骤采血制备上清液

2、：指尖采血40μl，全血加入0.24ml的蛋白沉淀剂混匀，3500~400转/分，离心10分钟，取上清待测。运动方案：用功率自行车进行大强度运动训练建立运动实验模型（自行设计）。空白管标准管测定管蒸馏水（ml）0.023mmol/L标准液（ml）0.02上清液（ml）0.02酶工作液（ml）111显色剂（ml）0.20.20.2混匀，37℃水浴准确反应10分钟终止液（ml）222混匀，530nm，1cm光径，蒸馏水调零，测各管吸光度标准浓度为3mmol/L，稀释倍数为7倍计算公式：测定OD值—空白管OD值标准浓度血乳酸（mmol/L）=---------------------------

3、-------×(3mmol/L)×稀释倍数(7倍)标准OD值—空白管OD值五、实验结果六、注意事项6注意事项1、设计运动方案时，应注意检索文献资料，注意运动时间与强度的关系，注意研究对象的物种差异。2、严格按照实验方法与步骤进行操作。3、做好实验数据的统计分析。1、实验目的2、实验步骤3、实验结果：公式计算4、实验结果分析：乳酸是糖酵解供能系统的终产物，又是有氧代谢系统的重要氧化物质，运动时乳酸主要在骨骼肌中生成，可在肝内经糖异生途径转变为葡萄糖，在供能体系中占有重要地位，可直接用运动后血乳酸的浓度来评定无氧代谢的能力。如400m跑后，血乳酸低于10mmol/L表明无氧代谢能力差；达到1

4、4-15mmol/L表明无氧酵解能力强。七、实验报告