实验一细菌的形态学检查.ppt

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1、实验一细菌的形态学检查西安医学院病原生物学与免疫学教研室目的要求掌握细菌的基本形态与特殊结构。掌握细菌涂片的制作及革兰染色法，并了解其实际意义；病人痰标本直接涂片及抗酸染色法。掌握显微镜油镜头的使用与保护。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验内容一、细菌的形态结构观察二、细菌涂抹标本片的制作及革兰染色法三、病人痰标本直接涂片及抗酸染色法四、油镜的使用与保护五、活菌运动的观察——压滴法Xi’anＭedicalUniversity微免教研室思考讨论油镜头有哪些标志?如何正确使用油镜头？革兰染色法最关键的步

2、骤是哪一步？如果这一步掌握不好会对染色结果有何影响？革兰染色法的结果怎样判断？有何实际意义？抗酸染色过程中应注意什么问题？如果痰标本片未查到抗酸菌，可完全排除肺结核吗？为什么？Xi’anＭedicalUniversity微免教研室实验报告1、绘图：葡萄球菌、肠道杆菌、霍乱弧菌、破伤风梭菌芽胞、伤寒杆菌鞭毛、产气荚膜梭菌荚膜。2、记录并分析革兰染色结果。3、记录并分析抗酸染色结果。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室基本形态（示教）一、细菌的基本形态和特殊结构葡萄球菌肠道杆菌霍乱弧菌Xi’anＭedical

3、University微免教研室特殊结构（示教）一、细菌的基本形态和特殊结构伤寒沙门菌的鞭毛破伤风梭菌的芽胞产气荚膜梭菌的荚膜Xi’anＭedicalUniversity微免教研室材料二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法1、葡萄球菌、大肠杆菌混合菌液。2、载玻片、接种环、酒精灯。3、革兰染色液一套、吸水纸、香柏油。4、显微镜。Xi’anＭedicalUniversity微免教研室涂片、干燥、固定结晶紫初染(1分钟、水洗)碘液媒染(1分钟、水洗)95%乙醇脱色(30秒、水洗)稀释复红复染(1分钟、水洗擦干)低倍镜对光、寻找细

4、菌，油镜观察紫色——G+菌，红色——G-菌二、细菌涂抹标本制作及革兰染色法细菌涂抹标本制作革兰染色法镜检结果Xi’anＭedicalUniversity微免教研室痰标本——涂片、干燥、固定石炭酸复红加热，染色3-5min3%盐酸乙醇脱色，30秒美蓝复染1min镜检结果：红色——抗酸菌蓝色——非抗酸菌抗酸染色法Xi’anＭedicalUniversity微免教研室革兰染色1.涂片、干燥、固定2.结晶紫初染(1分钟、水洗)3.碘液媒染(1分钟、水洗)4.95%乙醇脱色(30秒、水洗)5.稀释复红复染(1分钟、水洗)6.低倍镜对

5、光，油镜观察紫色——G+菌，红色——G-菌抗酸染色1.涂片、干燥、固定2.石炭酸复红加热，染色3-5min3.3%盐酸乙醇脱色，30秒4.美蓝复染1min5.镜检：红色—抗酸菌蓝色—非抗酸菌Xi’anＭedicalUniversity微免教研室油镜头的使用原理空气折光率1.000香柏油折光率1.515玻璃折光率1.520Xi’anＭedicalUniversity微免教研室