血液蛋白质组学的研究技术及进展.pdf

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1、生物技术通讯b_WW_=G4cH4/W_M,c/b/Yde;EP!2c;P)f9EPB%""’’’*文章编号：!""#$"""%&%""’(")$"’’*$")综述血液蛋白质组学的研究技术及进展巩燕，李晓海，应万涛，蔡耘，钱小红军事医学科学院放射医学研究所，北京!""+*"；北京蛋白质组研究中心，北京!"%%"’［摘要］人血液含有来源于几乎所有细胞、组织、器官的蛋白质，可以直接反映病理、生理状态，是各种疾病诊断、生物标志物发现的最有价值的标本。因此，长期以来，血浆蛋白质组一直是人们研究的热点，并被人类蛋

2、白质组组织（,-./）列为首批启动的重大国际合作研究项目。血浆蛋白质含量动态范围非常广、成分极其复杂，血浆蛋白质组的研究极富挑战性。近年来，血浆高丰度蛋白质去除、蛋白质0肽段分离、质谱鉴定、数据处理等多种相关技术都取得了很大的进展。本文简要综述了上述技术领域的研究和应用进展。［关键词］血浆；蛋白质组；样品处理［中图分类号］12+#［文献标识码］3!"#$%&’(")*+,-./)0/-,+1"+0"2")"/,#$3-,+4,"))/%5-,+)6"#1!"#!$%&’()*+%,-.%+’$)#!/%

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4、;675?;FJ>567LF;9JL;977L:N;?DP.E>6C>OF;7:856;<7:56:FQ:>685?8A>7;F6;6:>5?>F:>F8AL6;9FA:<;FN8;C>FR:F?86A;Q:FDPG;7L:F:L>6N::568J58<8A>57857:F:6785A;COF:L:568Q:EDAL>F>A7:F8S85J7L:OF;7:85A;57:57;6C>>EE>E;5JP.E>6C>OF;7:;C:867L:<8F678

5、57:F5>78;5>EA;EE>N;F>78;5E>95AL:?ND7L:,9C>5.F;7:;C:/FJ>58S>78;5&,-./(P,;T:Q:FB7L:857F8568AE>FJ:?D5>C8AF>5J:>5?A;COE:U87D;6C>OF;7:856C>R:67L:>5>ED686Q:FDAL>EE:5JV85JPWL86O>O:FF:Q8:T:?7L:OF;JF:66;56>COE:L>5?E85JBOF;7:850O:O78?:6:O>F>78;5BC>666O:A7F;C:7

6、FD8?:578<8A>78;5>5??>7>>5>ED68685OE>6C>OF;7:;C:F:6:>FAL?9F85J7L:E>67<:TD:>F6P［9":;+,5)］OE>6C>KOF;7:;C:K6>COE:7F:>7C:57血浆蛋白质组具有下列显著特点：!血浆蛋白质组是最复所鉴定的蛋白质也不同，因而人们发展了各种各样的技术以互杂的蛋白质组学研究对象，它含有至少!万种蛋白质。这是因为补，以尽可能多地鉴定蛋白质。人类蛋白质组组织（,9C>5.F;V血浆蛋白质来源广泛，几乎包括所有细胞、组织、器官

7、的蛋白。另7:;C:/FJ>58S>78;5，,-./）的人类血浆蛋白质组计划（,-./外，还存在大量的蛋白质剪切体、翻译后修饰（特别是糖基化）、.E>6C>.F;7:;C:.F;I:A7，,...(的初级阶段，给各个实验室分发降解片段，其中仅免疫球蛋白就有上百万种蛋白形式。"血浆蛋同样的样品，以评价不同技术路线得到的蛋白质鉴定情况。白质丰度差异巨大，远远超过目前分离鉴定所达到的动态范围。人血清白蛋白（L9C>56:F9C>EN9C85，,G3）在血浆0血清中的含!血浆高丰度蛋白质去除技术量最高，约占所

8、有蛋白质总量的*"X；%%种最高丰度的蛋白，如,G3、4JY、运铁蛋白、#%$巨球蛋白、#!$抗胰蛋白酶等占血浆总血浆高丰度蛋白的去除至关重要，可明显提高低丰度蛋白蛋白质含量的##X以上，而其余不足!X的由上万种低丰度蛋白质的上样量、色谱分离的峰容量和质谱检测的动态范围。根据蛋构成。高、低丰度蛋白的浓度可差!"!%数量级，是目前血浆蛋白白质的理化性质，如等电点、相对分子质量、疏水性、表面电荷、质组发展的瓶颈所在。鉴于血浆包含血清的所有成分，