葡萄球菌-“D试验” -章浙忠说课讲解.ppt

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1、葡萄球菌-“D试验”章浙忠2016.2.30149例葡萄球菌药敏结果分析葡萄球菌类型ErSClSErRClRErRClSErRClS合计Dtest（-）Dtest（+）凝固酶阴性葡萄球菌346301317（56.7%)79金黄色葡萄球菌339281315(53.6%)70MLSB类抗生素介绍林可酰胺类链阳性菌素红霉素克拉霉素(甲基红霉素)阿齐霉素克林霉素林可霉素MLS抗生素大环内酯类B类链阳霉素类(streptagramintypeB)奎奴普丁MLS类抗生素机制1、MLS类抗生素革兰阴性细菌天然耐药性。2、临床主要用于治疗葡萄球菌感染。3、对青霉素或头孢菌素过敏。MLS抗生素核糖体诱导

2、克林霉素耐药----耐药机制一msrA基因主动泵出机制排出：大环内酯类和链阳霉素B克林霉素没有转运作用可表现为对大环内酯类抗生素耐药但对克林霉素敏感,即MS耐药型----用克林霉素治疗葡萄球菌感染是有效的。诱导克林霉素耐药----耐药机制二erm基因红霉素核糖体甲基化酶23SrRNA的腺嘌呤残基6位双甲基化50S核糖体的亲和力降低结构型耐药是指erm基因上游的启动子发生突变,使erm基因产物稳定表达产生耐药性,其表型为对大环内酯类抗生素和克林霉素均耐药。诱导型耐药是指大环内酯类抗生素作为诱导剂通过衰减机制诱导erm基因产物的表达而产生耐药,其表型为对大环酯类抗生素耐药而对克林霉素敏感。

3、诱导克林霉素耐药----耐药机制二克林霉素治疗失败的案例主要在于诱导型erm机制所致。而MLSb诱导耐药性的影响范围则因地域不同而异,一些已经发表的研究表明分离出的葡萄球菌中有45%具有诱导耐药性。如果带有MLSb诱导耐药性的葡萄球菌的体外药敏结果被报告出来,则很有可能出现克林霉素治疗失败的情况。Dtest介绍Dtest是一种相对简单的确定诱导型克林霉素耐药性的程序。1、纸片扩散法：即将一张红霉素（15μg)纸片放在离一张克林霉素(2μg)纸片15mm到26mm的地方。孵育16-18h后,与红霉素相邻测抑菌圈边缘出现“截平”（称作D抑菌圈）=诱导克林霉素耐药。2、肉汤微量稀释法：将一定

4、菌量接种于肉汤培养基中，孵育后，任何有菌生长说明细菌已经诱导产生克林霉素耐药性。诱导性克林霉素耐药（erm介导）葡萄球菌-“D试验”患者不会对克林霉素有反应-报告克林霉素耐药无克林霉素诱导（msrA介导）真的克林霉素敏感-报告克林霉素敏感“D”阳性阴性15～26mm葡萄球菌诱导性克林霉素耐药的MIC检测方法4.0µg/ml红霉素0.5µg/ml克林霉素Nogrowth=无诱导性克林霉素耐药生长=诱导性克林霉素耐药Dtest报告形式NCCLS还建议做以下报告选择。如果最初的药敏报告显示为一种对红霉素耐药、但对克林霉素敏感的葡萄球菌，那么除非进行Dtest，否则克林霉素敏感这个结果不能报出

5、。Dtest报告结果Dtest结果克林霉素阳性报告：分离株“克林霉素耐药”报告中加入:根据诱导克林霉素耐药试验，推测此菌株对克林霉素耐药。在某些病人克林霉素可能任有效。我科细菌鉴定仪提示——Dtest阳性我科细菌鉴定仪提示--Dtest阳性我科细菌鉴定仪提示--Dtest阴性我科细菌鉴定仪提示--Dtest阴性谢谢指导