吸收放散试验-文档.doc

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1、吸收放散试验1、原理：有些弱A或弱B抗原的红细胞不为标准抗A或抗B试剂所凝集，但可以吸附特异性抗体，并用标准红细胞检测放散液中是否含有特异性抗体。采用吸收放散的试验方法可间接检测。2、标本采集与处理2.1静脉采集2.2抗凝剂：使用EDTA-K2抗凝，以免发生补体参与的溶血反应。2.3标本处理：标本应尽快送实验室，离心分离出血浆，待用，4℃冰箱中保存3天。2.4严重溶血和脂肪血的标本不能测定。3、试剂：长春生物制品研究所生产的单克隆抗体：抗A,抗B试剂。4、操作4.1、将受试者的红细胞用生理盐水洗涤3次，取压积红细胞1份与等量

2、的标准抗A或抗B试剂血清充分混合，置于4℃温浴1小时，每10分钟振摇1次以充分吸收。4.2、离心分离血清，用大量生理盐水洗红细胞5次以上，留下最后一次的洗液做游离抗体检测。4.3、对已洗过的洗涤红细胞加入等量的生理盐水，混匀，将该试管放在56℃水浴中10分钟，振摇，以洗脱吸附的抗体。水浴后立即离心取出樱桃红色的上层洗脱液。4.4、分别取樱桃红色的上层洗脱液200ul分别加入装有2%的对应标准红细胞200ul和2%O型标准红细胞200ul的两支试管中,3000转分离心1分钟，观察结果。5、结果判读如果洗脱物与对应标准红细胞发

3、生凝集或反应，不与O型标准红细胞反应，则该患者细胞表面上存在能够结合特异性抗体的活性A或B抗原。如果洗脱物也与O型标准红细胞反应，表明有非特异性的反应，结果不准确。