生物技能大赛题目含答案复习过程.doc

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1、生物技能大赛题目含答案精品文档第五届温州大学生物学科实验技能大赛答案1.药品配置中应注意哪些问题？请给出应用固体氯化钠粉末配置1L用于细胞生物学实验的生理盐水的方法（包括仪器、药品称量等各个环节）（10分）注意事项：药品本身的性质（吸水性、氧化性、毒性、酸碱性、挥发性等）对应的取样工具、保护措施；药品选用的纯度级别；天平和量筒的正确使用；各种器具不可混用、取出的药品不能放回、药瓶盖的放置等防止污染的方法；配制后存放的方法及标签（4分）细胞生物学实验用生理盐水配制：0.9%氯化钠、去离子水(超纯水)；（2分）在天平上放一张称量纸，去皮，用药勺

2、取NaCl固体，称取9.0g；在烧杯中用少量去离子水溶解，冷却至室温后，用玻璃棒引流，移入1000ml容量瓶中；用蒸馏水少量2-3次冲洗烧杯，并将液体倒入容量瓶，向容量瓶中加入蒸馏水至刻度线下1cm左右，用滴管逐滴加入蒸馏水至刻度线，盖上瓶塞，轻轻倒转容量瓶数次，将溶液混合均匀。（用1000ml量筒量取1L去离子水，放入烧杯中，将称好的NaCl倒入烧杯，用玻璃棒搅拌至完全溶解）。将溶液倒入试剂瓶中盖好盖子，写好标签配用。（4分）2.离心机可分为哪几类？各类离心机有哪些应用？使用离心机需要注意哪些问题？（10分）分类及应用（6分）：a、制备型

3、（分离生物大分子、细胞器和病毒等）、分析型（测试样品沉降系数、分子量、构象、纯度等）、分析制备型；b、低速离心机（分离大颗粒与溶液、血浆与血清等）、高速（DNA、RNA、各种细胞、无机物溶液、悬浮液及胶体溶液等分离浓缩和提纯）、超速（亚细胞器、病毒、核酸、蛋白质和多糖等）；c、台式、多管微量式、细胞涂片式、高速冷冻式，大容量低速冷冻式；台式低速自动平衡离心机（a、b、c任一种都对）注意事项（4分）1离心机要放在平坦和结实的地面或实验台上，不允许倾斜；2通常离心机都会有登记表，请在使用前确实登记使用者、转头、转速、时间；3离心管一定要用天平平

4、衡重量（重量平衡），盖上离心管盖子并旋紧；4把平衡好的离心管对称地放入离心陀中（位置平衡），盖上离心陀的盖子，注意有无旋紧；5完成离心时，要等待离心机自动停止，不允许用手或其他物件迫使离心机停转，待转头完全静止后，才能打开舱门，请尽快取出离心管，先观察离心管是否完全，以及沉淀的位置，尽速把上清倒出，小心不要把沉淀弄混浊。3.请问哪些生物实验需要进行高压灭菌（列举三个以上）？常用的高压灭菌条件是什么？如何进行高压灭菌及操作中的注意事项有哪些？（10分）在微生物实验中，培养微生物所用的器具及培养基、培养液需要预先灭菌，以除去杂菌；被微生物等生物

5、材料污染的玻璃器皿应立即高压灭菌，然后清洗；一些不要的菌种等，一定要消毒和高压灭菌处理后方可弃掉。开展病原微生物类实验所产生的废弃物,在分类处置前,必须先自行高压蒸汽灭菌；发酵实验结束后活菌体必需加热杀死后就能排放；细胞培养和组织培养所用的器具及培养基、培养液需要预先灭菌，以除去杂菌；基因工程操作所用的一切塑料器具（eppendorf管、tip等），在使用前都应装入盒子和瓶子中灭菌，且装盒或装瓶过程中都应采用镊子或戴上一次性手套进行操作，不能直接用手去拿，严防手上杂酶污染。（任何三个都对，3分）收集于网络，如有侵权请联系管理员删除精品文档对

6、于一般的试剂、溶液或玻璃器皿等，一般是用121℃高温灭菌20分钟，装液量多的或者含玉米浆的则需30分钟甚至更长时间。而对于葡萄糖、乳糖等则需115℃高温灭菌20-30分钟。温度太高容易变色。（主要是121℃）（2分）首先，检查锅内蒸馏水量是否充足，第二，检查个个阀门及开关是否工作正常。第三，将待灭菌的物品用一层牛皮纸或两层报纸包好，一定要包完整！放入锅内，物与物之间一定要有空隙。第四，盖好锅盖，螺母对称拧紧，打开放气阀，关闭安全阀。第五，打开电源观察放气阀是否有蒸汽流出，确定后关闭放气阀，待压力表到达0.1-0.15kpa（温度121℃左右

7、）时计时，15-30分钟，关闭开关。第六，待压力表指针归零后，打开放气阀，按对称方式打开锅盖，取出物品。（2分）注意事项:1.锅内水必须用蒸馏水或纯化水。2.锅盖螺母必须对称拧紧。3.一定要在放气阀出大量蒸汽在关闭。4.当灭菌时间结束时，必须等到压力表归零在打开。5.灭菌锅超过最大耐受压力后，放气阀会自动弹开，此时锅内物品不能保证灭菌完全，需从新灭菌。高压灭菌液体终止时，不能快速排气使压力迅速降低；高压灭菌锅灭菌时，待灭菌的物品不能与含有腐蚀性抑制剂或化学试剂的物质放在一起灭菌；（3分）4.动物解剖实验中应注意哪些问题？（10分）实验预习：

8、熟悉动物器官血管位置，了解待观察部位。实验动物检疫、安抚：防止疾病感染及动物咬伤抓伤实验器具的使用：防止玻璃器皿、注射器、手术刀的创伤；实验操作：防止破坏关键部位、实验记录废弃物