基因工程及其应用ppt课件.ppt

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1、第2节基因工程及其应用能发荧光的热带斑马鱼普通热带斑马鱼是不发荧光的转鱼抗寒基因的番茄转基因鲑鱼同时具有高产、稳产和抗逆性等优良品质的农作物新品种.抗虫害的玉米问题探讨讨论：1、为什么把人的胰岛素基因转入到细菌中能表达产生胰岛素？2、你猜猜怎样才能把人胰岛素基因转入到大肠杆菌中去？转入人胰岛素基因的大肠杆菌所有的生物共用一套遗传密码。基因工程：又叫做基因拼接技术或DNA重组技术。通俗的说，就是按照人们的意愿，把一种生物的某种基因提取出来，加以修饰改造，然后放到另一种生物的细胞里，定向地改造生物的遗传性状。

2、一、基因工程目的基因供体细胞受体细胞获得新性状（人的细胞）（大肠杆菌）人的细胞DNA基因A人胰岛素基因基因BTGCTCTGGTGAATTCGACGAATGCACACTTAAGCGCTTAAGC人的胰岛素基因怎样提取？一、基因工程的基本工具（1）基因的“剪刀”：限制性核酸内切酶（限制酶）GAATTCCTTAAG一种限制酶只能识别一种特定的核苷酸序列，并在特定的切点上切割DNA分子。如:EcoRI限制酶大肠杆菌的一种ECORI限制酶识别GAATTC序列，并在G和A之间切开）。一、基因工程的基本工具（1）基因的

3、“剪刀”：限制性核酸内切酶CTTAAGGAATTCCTTAAGAATTCG黏性末端产生黏性未端（碱基互补配对）。特异性，即识别特定核苷酸序列，切割特定切点。黏性末端1、作用特点：2、结果：如果几个DNA分之被同一种限制酶切断的是否具有相同的黏性末端？思考:是GAATTCCGTAGAATTCGGATTCTTAAGGCATCTTAAGCCTAACATCTATC尝试写出下列序列受EcoRI限制酶作用后的黏性末端CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT练一练:GTAGATAGCTTCA

4、TGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATTGGCATCTTAAAATTCCGTAG如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？CTTCATGAATTCCCTAAGAAGTACTTAAGGGATT练一练:GGCATCTTAAAATTCCGTAG如果把两种来源不同的DNA用同一种限制酶来切割，会怎样呢？会产生相同的黏性末端，末端可以相互黏合，这种黏合只能使互补的碱基连接起来。脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA骨架缺口并未缝合？２、基因的针线──DNA连接酶DNA连接酶的作用是：

5、脱氧核糖和磷酸交替连接而构成的DNA骨架缺口缝合。这样得到的DNA分子是一个重组DNA分子！DNA连接酶DNA连接酶人的细胞DNAA2、要得到人胰岛素基因必须要用限制酶切几个切口？可产生几个黏性末端？TGCTCTGGTGAATTCGACGAATGCTACACTTAAGCGCTTAAGC要切两个切口，产生四个黏性末端。人的细胞DNA3、如何将目的基因导入受体细胞？这需要专门的运输工具，这就是运载体！你知道哪些可以当作运载体吗？常用的运载体有质粒、噬菌体和动植物病毒等。你知道质粒存在于哪些生物中吗？细菌、以及

6、酵母菌等生物中人的细胞DNA质粒是存在于细菌细胞质中独立于染色体而自主复制的环状双链DNA分子。ATCATGAGTCACTAGT标记基因如何将目的基因和运载体结合？首先将运载体取出。人的细胞DNAATCATGAGTCACTAGT1、用什么限制酶切？2、为什么要用同一种限制酶切？将运载体取出切出相同的黏性末端，刚好能碱基互补配对。用同种限制酶切。这样得到的DNA分子称为。人胰岛素基因DNA连接酶（重组质粒）重组DNA分子把目的基因插入运载体需要什么工具酶？连接什么部位？DNA连接酶连接脱氧核糖和磷酸交替连接

7、而构成的DNA骨架上的缺口。抗生素抗性基因人胰岛素基因将重组DNA导入受体细胞4、如何检测目的基因是否导入受体细胞中？根据受体细胞中是否具有标记基因表现出的性状，来判断目的基因是否导入。用含抗生素的培养基检测大肠杆菌中是否导入了重组质粒5、如果导入了目的基因，目的基因一定会表达吗？不一定。基因工程的基本操作步骤：四步曲：1、提取目的基因2、目的基因与运载体结合3、将目的基因导入受体细胞4、目的基因的检测和表达基因工程基因拼接技术或DNA重组技术生物体外基因DNA分子水平剪切→拼接→导入→表达人类需要的基因

8、产物基因工程的别名操作环境操作对象操作水平基本过程结果原理基因重组①基因工程的概念是什麽？②基因操作的工具酶有几种？分别是什麽？③基因的剪刀是什麽？结果？④基因的针线是什麽？⑤基因的运输工具是什麽？⑥最常用的运载体是什麽？⑦质粒的结构是什麽？复习我国生产的部分基因工程疫苗和药物1、基因工程与药物研制许多药品的生产是从生物组织中提取的。受材料来源限制产量有限，其价格往往十分昂贵。微生物生长迅速，容易控制，适于大规模工业化生产。