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1、46生命的化学2005年25卷1期TechniquesandMethodsCHEMISTRYOFLIFE2005,25(1)文章编号:1000-1336(2005)01-0046-03单细胞PCR技术及其应用陈茹冰黄原(陕西师范大学生命科学学院,西安710062)摘要:单细胞PCR技术是从生命的基本单位细胞水平上进行DNA或RNA分析的PCR方法。它为在单细胞水平上进行产前诊断、基因表达和DNA测序等领域的研究提供了简便而快捷的方法。随着该技术的不断改进和与芯片实验室技术
2、的结合,单细胞PCR在生命科学研究中将发挥更大的作用。关键词:单细胞PCR;遗传学诊断;基因表达;DNA测序中图分类号:Q78全基因组测序的完成仅仅是了解基因及其产物收稿日期:2004-09-24作用的第一步,功能基因组学正向着基于单细胞的国家自然科学基金资助项目(No.30070114)方向进行,使单细胞水平上的功能基因组研究成为作者简介:陈茹冰(1981),女,硕士生,E-mai:lrubing_chen@可能。目前已建立了多种方法来进行细胞和组织的stu.snnu.edu.cn;黄原
3、(1962),男,教授,联系作者,E-mai:lyuanh@snnu.edu.cn特定基因表达研究。然而,常规技术在异基因型组的上调。面对细胞外基质环境的改变,通过EGR-1三者之间的关系极其复杂,其机理尚有待研究。尤促进MT1-MMP的基因转录能启动内皮细胞裂隙入其是与Egr-1基因相关的,对新血管生成有抑制作侵。用Tf启动子突变子对内皮细胞系短暂转染实用的Egr-1DNA核酶、辅阻遏物NAB2等物质能否验表明:EGR-1既介导Tf启动子对剪切力的应答,应用于肿瘤治疗,值得进一步研究和探索。[
4、16]也能在流体介导的TF诱导过程中有直接作用。参考文献(2)持续性的骨骼肌收缩能促进新血管生成。[1]GashlerALetal.MolCellBiol,1993,13(8):45564571低电压刺激神经可导致骨骼肌持续性的收缩。而长[2]HamiltonTBetal.Biochemistry,1998,37(7):20512058时间、持续性的低电压刺激神经能中等程度增加骨[3]FuMetal.JBiolChem,2002,277(30):2680826814[4]Mechtc
5、heriakovaDetal.Blood,1999,93(11):38113823骼肌中EGR-1蛋白表达(但未观察到Egr-1mRNA[5]AbeMetal.Angiogenesis,2001,4(4):289298[17]改变),证实了骨胳肌持续性收缩可诱导Egr-1[6]LiuLetal.Blood,2000,96(5):17721781基因在骨骼肌的表达。[7]TilsonMDetal.IntJSurgInvestig,2000,1(5):4534574.组织损伤中新血管生成
6、与Egr-1[8]FahmyRGetal.NatMed,2003,9(8):10261032Egr-1在急性损伤后可立即表达。创伤后约12[9]HoustonPetal.BiochemBiophysResCommun,2001,283(2):480486h,伤口边缘基底细胞的形态及内部成分开始发生变[10]LucernaMetal.JBiolChem,2003,278(13):1143311440化,静息细胞中不表达的基因如Egr-1开始表达。[11]YamaguchiSetal.L
7、abInvest,2002,82(7):949956在啮齿类动物皮肤创伤处,EGR-1可增加胶原产生、[12]TsaiJCetal.AmJPhysiolCellPhysiol,2000,279(5):[18]促进新血管生成、加速伤口的闭合。在损伤部C14141424[13]StulaMetal.MolCellBiochem,2000,210(1-2):101108位,EGR-1也可刺激某些促进修复组织的生长因子[9][19][14]YunSetal.JBiolChem,2002,277
8、(38):3480834814的产生。Szabo等发现新血管生成过程中,与[15]HaasTLetal.JBiolChem,1999,274(32):2267922685内皮细胞增殖有关的蛋白质表达有赖于EGR-1转[16]HoustonPetal.ArteriosclerThrombVascBiol,1999,19(2):录的活化。由此认为,用Egr-1基因治疗可加速损281289伤组织的愈合过程,EGR-1对损伤组织修复可能具[17]MichelJBetal.JCl
