色素的提取和分离实验原理、材料.ppt

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1、光合色素的提取和分离▲实验原理提取——色素不溶于水，溶于有机溶剂（乙醇、丙酮等）分离——色素在层析液中的溶解度不同。▲实验目的1.色素的提取和分离。2．验证叶绿体中色素的种类和各种色素的颜色。纸层析法溶解度高的随层析液在滤纸上扩散得快；反之则慢。▲分离方法实验步骤▲实验步骤（见实验册P32）提取色素→制备滤纸条→画滤液细线→分离色素→观察记录实验步骤1.提取叶绿素研磨、匀浆过滤提取液称取5克的菠菜緑叶，剪碎，放入研钵中。加入少许二氧化硅和碳酸钙，再加入3mL无水乙醇。——新鲜、颜色深绿的叶片（成功关键1）研磨充分▲过量易使滤液颜色变浅中和有机酸，防止色素被破坏☆各试剂

2、作用SiO2——CaCO3——95%的乙醇（丙酮、石油醚）——溶解色素▲不加入则会发生去镁反应，叶绿素分子成为褐色的去镁叶绿素，滤液呈黄绿色或褐色▲不加入则色素不能溶解，滤液几乎无色☆研磨的要求☆收集滤液的要求——迅速、充分（成功关键2）有机溶剂易挥发充分破坏叶绿体，使色素完全释放——及时塞紧试管口，防止挥发（成功关键3）2.制备滤纸条☆制备要求——使色素扩散均匀，色素带整齐——标记作用将一端剪去两角在距此端1cm处画一铅笔横线不要弄脏弄湿滤纸条用毛细吸管吸取少量滤液，沿铅笔线均匀画出一条直的滤液细线。重复3-4次。1cm滤液细线3.画滤液细线——防止色素带重叠，使扩

3、散起点一致——增加色素含量，使效果更明显细、直、均匀重复2～3次（干后再画）☆画线要求（成功关键4）分离色素3mL层析液→小烧杯→滤纸条插入层析液中（滤液细线一端朝下）→用培养皿盖住烧杯口☆操作要求（色素会溶于层析液中）（防止挥发）（成功关键5）滤液细线不能接触层析液盖住烧杯口胡萝卜素（扩散速度最快，色素带最窄）叶黄素叶绿素a（色素带最宽）叶绿素b（扩散速度最慢）▲实验结果扩散速度快慢与（）有关色素带的宽窄与（）有关溶解度高低色素含量多少绿叶中的色素叶绿素类胡萝卜素叶绿素a约占总量的3/4约占总量的1/4呈蓝绿色叶绿素b呈黄绿色胡萝卜素呈橙黄色叶黄素呈黄色吸收红光、蓝

4、紫光吸收蓝紫光实验相关知识：一、绿叶中的色素种类及生理作用：