质谱技术在医学检验中的应用课件.ppt

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1、质谱技术在医学检验中的应用Applicationofmassspectrometryinmedicalexamination曾经，我们偏爱这样的...难辨别易误判花费高BUT所以，后来我们钟情这样的...yes更低的检出限值不受抗体和特殊生化反应限制更高的灵敏度特异度准确度精确度目录质谱仪在临床检验中应用总结与展望质谱技术及质谱仪质谱技术与质谱仪Msspectrometryandmsspectrometer质谱是什么？特殊的天平：称量离子的质量质谱能做什么？定性：化学物的结构定量：混合物的组成领域：化学、生物

2、学、医学、药学、环境物理、地质、能源等质谱技术与质谱仪质谱的基本概念Msspectrometryandmsspectrometer质谱分析是先将物质离子化，再按离子的质荷比将其分离，然后测量各种离子的谱峰强度而实现分析目的的一种分析方法。质量是物质的固有特性之一，不同的物质有不同的质量谱--质谱，利用这一特性，可以进行定性分析；谱峰强度又与它代表的化合物含量有关，利用这一点，可以进行定量分析。质谱技术与质谱仪质谱技术与质谱仪高基体进样系统(HMI)稀释气入口半导体冷却控温雾室离轴偏转透镜低流速进样高速频率匹配

3、的27MHz射频发生器高性能真空系统池气体入口高频率(3MHz)双曲面四极杆快速同时双模式检测器(9个数量级线性动态范围)高离子传输效率、耐高盐接口第3代八极杆反应池系统(ORS3)以Agilent7900ICP-MS为例质谱在临床检验中应用TheapplicationofMsinclinicaltest质谱在临床检验中应用3.临床生物化学检验的应用4.分子生物诊断中的应用5.在参考方法建立和研制标准物质方面的应用2.临床免疫学检验的应用1.微生物检验方面Microbiologicaltest微生物检验绝大多

4、数微生物显示很少的形态学特征•Selectivemediaplating/biochemicaltests生化测试•Pulsedfieldgelelectrophoresis(PFGE)脉冲场凝胶电泳•PCRbaseddetection(several)基于聚合酶技术的检测方法•Microarrays/FISHhybridization/fluorescencemicroscopy核酸探针•RiboPrinterDNA杂交•FT-IR红外光谱•FAME(fattyacidmethylester)GC-MS细胞

5、脂肪酸甲基酯微生物检验现有微生物鉴定方法+MALDI-TOF微生物特征蛋白指纹图谱分析微生物检验以MALDI-TOF为例，演示工作流程微生物检验步骤一：样品制备微生物检验步骤二：采集图谱质谱图---多数为核糖体蛋白信号微生物检验步骤三：数据库比对绿色线条代表完全吻合的峰黄色线条表示在较宽边缘吻合红色线条表示在范围内没有吻合表格给出了评估和排序的结果。微生物检验微生物鉴定得分及含义微生物检验质谱谱图-不同菌种谱图不同质谱能找出种间和株间特异保守峰作为生物标记从而将其区分开微生物检验Microbiological

6、test检验优势1.检测速度快，例如一个病原微生物的质谱检定实验，包括样本的采集和制备，整个过程不到10min2.样本用量少3.样本前处理简单4.特异性和准确性高，例如金黄色葡萄球菌的表型鉴定5.高敏感性微生物检验应用1.可用于多种微生物样本，如痰液、血液、尿液、脑脊液和胸腹腔积液等2.可用于几乎所有类型的病原体鉴定和分类检测，如细菌、真菌及其孢子、病毒、寄生虫等3.可对病原的多种成分进行分析，包括蛋白质、脂质、脂多糖、脂寡糖、DNA、多肽及其他可被离子化的分子质谱在临床检验中应用3.临床生物化学检验的应用4

7、.分子生物诊断中的应用5.在参考方法建立和研制标准物质方面的应用2.临床免疫学检验的应用1.微生物检验方面Applicationofclinicalimmunologicaltest临床免疫学检验的应用Applicationofclinicalimmunologicaltest在癌症方面，如前列腺癌及前列腺增生、卵巢癌、胰腺癌、膀胱癌、乳腺癌、肺癌、肝癌、肾癌、结肠癌、喉癌、鼻咽癌、食道癌等，都发现了特异的蛋白或某些蛋白的增加或者减少临床免疫学检验的应用Applicationofclinicalimmunol

8、ogicaltest尤其质谱检测技术在泌尿系统中的应用发展迅速。由于其检测的样本为尿液，对患者身体不造成伤害，不仅可以早期诊断肾脏疾病，而且避免或减轻了传统侵入性方法如肾脏活检等给患者带来的痛苦，提高患者治疗的依从性和存活率。临床免疫学检验的应用Applicationofclinicalimmunologicaltest采用液相色谱-多重反应检测-质谱(LC-MRM/MS)方法通过同时定量测定血浆样