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《行业标准：GB 5009.272-2016 食品安全国家标准 食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定.pdf》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在行业资料-天天文库。
1、中华人民共和国国家标准GB5009.272—2016食品安全国家标准食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定2016-12-23发布2017-06-23实施中华人民共和国国家卫生和计划生育委员会发布国家食品药品监督管理总局GB5009.272—2016前言本标准代替GB/T21493—2008《大豆磷脂中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定》和NY/T1798—2009《植物油脂中磷脂组分含量的测定高效液相色谱法》。本标准与GB/T21493—2008和NY/T1798—2009相比,主要变化如下:———标准名称修改为“食
2、品安全国家标准食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定”;———统一了标准曲线范围。ⅠGB5009.272—2016食品安全国家标准食品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇的测定1范围本标准规定了高效液相色谱法测定大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇三种组分含量的方法。本标准适用于含油大豆磷脂、脱油大豆磷脂、大豆油、菜籽油、花生油、葵花籽油中磷脂酰胆碱(PC)、磷脂酰乙醇胺(PE)、磷脂酰肌醇(PI)的测定。本标准不适用于大豆溶血磷脂酰胆碱及大豆溶血磷脂乙醇胺的测定。2原理试样直接溶
3、解或经三氯甲烷提取,氨基固相萃取柱净化后,高效液相色谱分离,紫外检测器检测,外标法定量。3试剂和材料除非另有说明,本方法所用试剂均为分析纯,水为GB/T6682规定的一级水。3.1试剂3.1.1正己烷[CH3(CH2)4CH3]:色谱纯。3.1.2异丙醇[(CH3)2CHOH]:色谱纯。3.1.3乙酸(CH3COOH):色谱纯。3.1.4三氯甲烷(CHCl3)。3.1.5乙醚(CH3CH2OCH2CH3)。3.1.6甲醇(CH3OH):色谱纯。3.2试剂配制3.2.1乙酸水溶液(1mL/100mL):吸取1mL乙酸,加入适量水中,用水定
4、容至100mL。3.2.2正己烷-异丙醇-乙酸水溶液混合溶液(8+8+1):取正己烷80mL,异丙醇80mL,乙酸水溶液10mL,混匀。3.2.3乙酸-乙醚混合溶液(2+144):取乙酸4mL和乙醚288mL,混匀。3.2.4三氯甲烷-异丙醇混合溶液(2+1):取三氯甲烷200mL和异丙醇100mL,混匀。3.3标准品3.3.1磷脂酰胆碱(CAS号:8002-43-5):纯度大于95%。3.3.2磷脂酰乙醇胺(CAS号:39382-08-6):纯度大于95%。1GB5009.272—20163.3.3磷脂酰肌醇(CAS号:97281-5
5、2-2):纯度大于95%。3.4标准溶液配制磷脂标准混合溶液:分别准确称取20mg磷脂酰胆碱、20mg磷脂酰乙醇胺与10mg磷脂酰肌醇(精确至0.1mg),用正己烷-异丙醇-乙酸水溶液混合溶液溶解并定容到10mL,此时磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇浓度分别为2mg/mL、2mg/mL、1mg/mL。分别准确吸取此溶液0.25mL、1.25mL、2.50mL、3.75mL,并用正己烷-异丙醇-乙酸水溶液混合溶液定容到5mL。配制的混合标准液中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺浓度分别为0.1mg/mL、0.5mg/mL、1mg/mL、1.5m
6、g/mL、2mg/mL,磷脂酰肌醇浓度分别为0.05mg/mL、0.25mg/mL、0.5mg/mL、0.75mg/mL、1mg/mL。密封后低于-16℃保存备用。3.5材料氨基固相萃取柱:1000mg/6mL,或性能相当者。4仪器和设备4.1液相色谱仪:带紫外检测器。4.2分析天平:感量1mg和0.1mg。4.3具塞试管:100mL。4.4涡旋振荡器。4.5旋转蒸发仪:转速10r/min~120r/min。4.6离心机:转速至少5000r/min。4.7氮气浓缩装置。5分析步骤5.1试样制备5.1.1大豆磷脂试样制备及前处理试样应避光
7、放在密闭和防潮的容器内。样品在使用前充分混匀。依据样品中磷脂酰胆碱、磷脂酰乙醇胺、磷脂酰肌醇含量,称取样品15mg~50mg(精确至0.1mg),用正己烷-异丙醇-乙酸水溶液混合溶液溶解并定容至5mL,经0.45μm微孔膜过滤。密封后低于-16℃保存备用。5.1.2油脂试样制备及前处理试样按GB/T5524进行扦样和分样,分取50g,装入样品瓶备用。准确称取油脂试样4g(精确至1mg),置于100mL具塞试管中,加入50.0mL三氯甲烷,涡旋混合。先用1.0mL三氯甲烷活化氨基固相萃取柱,将10.0mL油脂三氯甲烷溶液移入氨基硅胶固相萃
8、取柱中,然后依次用2.0mL三氯甲烷-异丙醇混合溶液和3.0mL的乙酸-乙醚混合溶液淋洗小柱,然后用3.0mL甲醇洗脱出磷脂,再重复4次,收集洗脱液。洗脱液用旋转蒸发仪,在45℃蒸至近干,转为氮吹,吹干后加
