实验一 种子活力测定.doc

《实验一 种子活力测定.doc》由会员上传分享，免费在线阅读，更多相关内容在教育资源-天天文库。

1、高级植物生理实验报告种子生理农学院农药学东保柱2013年12月27日种子活力种子活力即种子的健壮度，是种子发芽和出苗率、幼苗生长的潜势、植株抗逆能力和生产潜力的总和，是种子品质的重要指标。长期以来都用发芽试验检验种子的质量，生产实践表明，实验室的发芽率与田间的出苗率之间往往存在很大差距。由于种子活力是一项综合性指标，因此靠单一活力测定指标判定其总活力水平或健壮度是不科学的。实验1种子活力的测定种子发芽率、发芽势和发芽指数的测定（垂直板发芽法）一原理种子在适宜的水分、氧气、温度条件下经一段时间可以萌发。在最适宜条件和规定天数内，发芽的种子数与供试的种子的百分比，叫发芽率。为了表示萌发速度与整齐

2、度，反映种子活力程度，规定在短时间内能正常萌发的种子数叫发芽率（测定发芽与发芽天数可参看下述的《种子发芽试验的技术规定》）。发芽数与发芽相应天数之比的和叫发芽指数。二材料与设备1材料：小麦种子。2设备：玻璃板滤纸或湿沙恒温箱镊子3药品：1%次氯酸钠（NaClO）三实验步骤1选取完整健壮的种子10-15粒，三个重复，用1%次氯酸钠消毒0.5—1min,将种子均匀地排列在有滤纸的培养皿中，种子之间留有一定距离，加入适量蒸馏水，放于所需温度条件下萌发。2每天定时记录发芽粒数。根据附表《种子发芽试验的技术规定》计算种子的发芽势、发芽率和发芽指数。3计算正常发芽的种子数1、发芽率（%）=×100供试种

3、子数2、发芽指数(式中：Gi—发芽指数Gt——在时间t日发芽日数Dt——相应的发芽日数四注意事项1对于1—2天内全部萌发的迅速发芽类型种子，不适用上述公式计算，宜采用简化活力指数（见实验21）。2种子发芽试验的技术规定（附表）实验2种子活力指数的测定一原理萌发种子幼根的生长势是反映活力的一个较好生理指标，如将发芽指数与幼苗生长量联系起来（二者的乘机），以活力指数（Vl）来表示，可以作为种子的活力指标。但是，对于一些萌发迅速的种子，不必要计算活力指数，可用发芽率乘幼苗生长量的简化活力指数（G·S）表示。对于具明显主根的种子如花生大豆等，幼苗生长量可用胚根长或胚根重表示。二．材料与设备1材料：小

4、麦种子。2设备：玻璃板恒温箱发芽缸（或箱）约20cm高尺子或天平滤纸细绳或橡皮筋3药品1%次氯酸钠（NaOCl）三．实验步骤1选取完整健壮的10-15种子，在水中吸胀2—4小时后，采取玻璃板直立发芽法。玻板直立发芽法：发芽箱由塑料板制成，规格为20×15×20cm,玻板规格20×15cm，滤纸规格42×15cm,对折滤纸，平铺在玻板，掀开上层滤纸，用蒸馏水湿润下层滤纸，将种子横向排列在滤纸中部，胚向下，保持一定粒距。然后将上层滤纸覆盖在种子上。如种子较大，可用细绳或橡皮筋缚扎在覆盖种子处的滤纸外面，防止种子滑落。玻板垂直插入发芽箱中，玻板间保持一定距离。在发芽箱中加入约2cm深蒸馏水层，加盖

5、，留气孔，放在所需温度条件下萌发。2.萌发3天（72小时）后统计发芽率及测量胚根长度和下胚轴长度（大豆花生棉花），如小麦水稻，则需剪下须根称重，或测量幼苗长度。3.计算式中：vl——活力指数Gt——在时间t日的发芽数Dt——相应的发芽日数S——幼苗生长势（平均长度或干、鲜重）简化活力指数（G·S值）=发芽率（%）×生长量（平均长度或干量，鲜重）四注意事项1玻板直立发芽时应在密闭的容器中，保持饱和湿度。2对于根毛不多的种子，可用重量来表示生长量。3为了防止发霉，种子萌发前应进行消毒（用1%次氯酸钠消毒0.5-1min）.实验3氯化三苯基四氮唑（TTC）法一原理有生命力的种胚在呼吸过程中产生氧化

6、还原反应，而无生命的种胚则无此反应。当TTC渗入种胚的活细胞内，并作为氢受体被脱氢辅酶Ⅰ或Ⅱ（NADH2或NADPH2）上的氢还原时，便由无色的氯化三苯基四氮唑（TTC）变为红色的三苯基甲（TTF）.染色后经丙酮提取，用分光光度计测出光密度值，从标准曲线查出TTC含量（µg/ml）,定量计算脱氢酶的活性。TTC含量高即脱氢酶活性强，表示种子活力高。二材料与设备1材料小麦种子2设备试管烧杯容量瓶（10ml）微量注射器或微量吸移管恒温水浴箱分光光度计研钵3药品丙酮0.1%TTC溶液连二亚硫酸钠NA2s2O4（保险粉）三实验步骤1待测小麦种子浸泡至充分吸胀，取种胚（（30粒胚））或整粒种子。将样品

7、放入试管中，加10ml0.1%TTC溶液，加盖，放在38℃左右的恒温水浴中（加盖保持黑暗条件）。反应时间长短随种子不同而异（2-3小时）。2反应到一定时间，清出TTC以终止反应，立刻用水冲洗样品2—3次，以粗滤纸吸取浮水，将样品倒入研钵，加少许分析纯石英砂及丙酮，充分研磨，把研磨液倒入10ml的容量瓶中，再用丙酮冲洗研钵2—3次，全部倒入容量瓶，定容10ml。3提取液在4000g下离心10分钟。4倾出红色上清