实验一,水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察

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1、实验一，水稻种子活力的快速测定、发芽特性观察一、实验目的：1、学习和掌握水稻种子活力的快速测定方法。2、观察不同温度和水分（氧气）条件下稻种的发芽情况。3、了解水稻种子的发芽特性及其与外界环境条件的关系。二、实验内容：（1）T.T.C法快速鉴定种子生活力原理：凡是有生命活力的种子胚，在呼吸作用过程中都有氧化还原反应，而无生命活力的种子胚则没有此反应。当TTC（氯化三苯基四氮唑）深入种子胚的活细胞内时，被种胚中的脱氢辅酶还原成不溶性的红色稳定不扩散的TTF（三苯甲腙）。（2）红墨水法快速测定种子生活力原理：凡是有活力的种子胚细胞的原生质膜具有半透性，选择性吸收物质的能力，一

2、般染料不能进入细胞内，胚部不染色。而丧失活力的种子，其胚部细胞原生质膜会丧失选择吸收能力，于是染料便能自由进入死细胞内而染色，所以可根据种子胚部是否被染色来判断种子的活力。（3）具备有发芽能力的水稻种子在一定水分、温度和氧气条件下，即能萌发生长。种子吸收水分以后，在30－35℃条件下发芽较快，但根芽生长受氧气供应程度的影响较大。氧气充足时，先长根，而水分充足氧气缺乏时，则芽鞘先伸长。因此，掌握适宜的温度，水分（氧气）条件进行催芽，才能达到芽齐、芽壮，为培育壮秧打好基础。三、实验仪器、设备:1.籼（A种，B种）、粳型水稻种子（C种，D种），恒温箱，冰箱，培养皿9cm（12套

3、）及15cm(36套)，定性滤纸15cm（一盒），烧杯250ml(12个)，刀片，游标卡尺，温度计，放大镜，镊子等。红墨水一瓶，红四氮唑（TTC）一瓶。2.直尺、天平、游标卡尺、干燥箱、网筛（装秧洗土）、剪刀。四、实验要求：每5人为1组，全班分为6组。1.水稻种子活力的测定1.1T.T.C法快速鉴定种子生活力①预先浸种：每组取待测粳、籼稻种子各20粒预浸，籼稻种子浸6-8小时，粳稻种子浸24小时。之后取出部分浸泡过的粳稻种子和籼稻种子于80℃的高温环境下煮10-15分钟并将其编号籼（A种，B种）和粳型水稻种子（C种，D种）。其中A，B两种有一种为煮过的，另一种为没有煮过的

4、，相应的C,D种也是同样的情况。水稻种子应剥除谷壳，并保持浸种温度在30-35℃，以增强种胚的呼吸强度，加速种子吸水，使得染色更加迅速。②染色：将浸好的水稻种子，剥去种皮，用刀片沿水稻种胚的中心线纵切为两半（测定的一半一定要带胚），取其中的一半置于培养皿中，培养皿要编号。在培养皿中加入适量的0.1%T.T.C（氯化三苯基四氮唑）溶液，以覆盖种子为度，然后置于40℃恒温箱中约0.5-1小时。③观察结果：可用肉眼或在解剖镜下观察，根据种子胚部是否产生红色反应以鉴定其生活力。1.2红墨水法快速测定种子生活力①浸种：同上述TTC法。②染色：每组取上述浸泡过的粳、籼稻种子各20粒，

5、沿胚的中心线纵切为两半，将一半置于培养皿中，加入少量5%的红墨水（以淹没种子为度），染色10-15分钟（如果温度高可短些）。染色后取出洗净，至冲洗液无色为止。③观察：检查种子的死活，凡种胚不着色或着色很浅者为活种子；凡种胚与胚乳着色程度相同的为死种子。（不论是活种子或死种子的胚乳均染成红色）1.3不同温度条件下稻种的发芽观察利用种子活力的测定方法筛选出有活力稻种进行发芽观察实验。将经过选种（风选或溶液选）后的种子事先浸种2-3天让其充分吸收水分。实验时，数籼、粳种子各两份，每份50粒，放入4个垫有三层吸水纸的培养皿中，分别置于15℃、30℃的恒温箱中，以后每天观察记载一次

6、发芽粒数，计算发芽率，并填入表一。发芽时间为5天，发芽结束时，对不同温度处理分别测量10粒发芽种子的根、芽长度，求其平均值，并将数据记入表二。1.4不同水分、氧气对根、芽生长的影响将籼、粳种子事先破胸（高温催芽就是在30－32℃下，经1-2天内破胸露白，破胸露白后，温度降至25－28℃左右），取上述种子各50粒，分别置于烧杯内，灌水8－10cm深；另取籼、粳破胸谷50粒，放入垫有吸水纸的培养皿中，加水保持湿润，然后将上述处理的种子，同置入30℃或35℃的恒温箱中发芽，2天后观察根、芽生长情况，4天后，取各种处理稻谷10粒，分别量根、芽长度，求出平均数，将数据记入表三。表一

7、不同时间水稻的发芽率处理第1天第2天第3天第4天第5天籼稻15℃平均30℃平均粳稻15℃平均30℃平均表二不同温度条件下种子发芽情况处理12345678910平均籼稻15℃芽（cm）根（cm）30℃芽（cm）根（cm）粳稻15℃芽（cm）根（cm）30℃芽（cm）根（cm）注：破胸，即高温催芽，就是在30~32℃下，经1~2天内破胸露白。破胸露白后，温度降至25~28℃左右，即所谓适温。表三不同水分、氧气对根、芽生长的影响处理12345678910平均籼稻浸水芽（cm）根（cm）润湿芽（cm）根（cm）粳稻浸水芽（cm）根（c