中药鉴定学实践教学实验方案.doc

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1、中药鉴定学四大鉴定的实践教学实验方案药用植物学、中药鉴定学课程安排的实验主要是验证性实验，本课题旨在将所学的药用植物学和中药鉴定学的知识串联起来，将中药鉴定学的四大鉴定通过学生自己来选题、设计、完成，并通过完成这一系列的实验，初步了解一个中药材质量标准制定的方法，为学生的毕业实习和今后的科研工作奠定一些基础。可行性分析：大三学生具有一定的理论和实验基础，本实验室具备相应的实验条件，指导老师具备指导能力，可以实施。完成情况好，有一定基础的，今后还可以纳入本科实习论文，进行进一步的实验研究。难点：药用植物种类繁多，自行选择研究对象，可能有的实验结果

2、会不理想。因此在实验不能顺利完成时，老师会为大家预备一种或数种药材完成实验。实验安排：准备阶段：每两位（或1-4位）学生自行选定一种药用植物，该种药用植物的选定或基于兴趣，或基于日常经验，或通过查阅参考文献。选定研究对象后，汇集资料，写出初步的方案、文献综述，需要时可考证用药历史。第一次实验（四个学时）：（1）准备好选定的新鲜植物及干燥后的植物，参考文献特别是植物检索表，加上老师的帮助，鉴定来源，写出学名，并进行植物形态的鉴定（复核）。（2）对干燥品（饮片）进行或完善性状鉴定。注：准备约200克（或更多）干燥品备用。第二次实验（八个学时）：（1

3、）进行显微鉴定（4学时）。采用表面撕片、徒手切面、粉末制片等技术，对样品进行显微鉴定。（2）对样品进行成分预试（4学时）。可自行设计方案。（部分）成分预试参考方案：1．水溶性成分的检识取中药粗粉5g，加50ml蒸馏水，浸泡过夜，或于50～60℃水浴中温浸1小时，滤过，滤液供检识下列各类成分：（1）糖、多糖和苷类1）Molish反应：取1ml供试液于试管中，加入1～2滴10%α-萘酚乙醇试剂摇匀，倾斜试管45°，沿管壁滴加1ml浓硫酸，分成两层。如在两液层交界面出现紫红色环，表明可能含有糖、多糖或苷类。2）斐林反应：取1ml供试液于试管中，加入新

4、配制的4～5滴斐林试剂，在沸水浴中加热数分钟，如产生砖红色氧化亚铜沉淀，表明可能含有还原糖。将上述溶液中沉淀滤过除去，滤液加1ml10%盐酸溶液，置沸水浴中加热水解数分钟，放冷后，滴加10%氢氧化钠溶液调pH至中性，重复上述斐林反应，如仍产生砖红色氧化亚铜沉淀，表明可能含有多糖或苷类。（2）氨基酸、多肽和蛋白质类1）茚三酮反应：取供试液点于滤纸片上，喷雾茚三酮试剂后，吹热风数分钟，如呈紫红色或蓝色，表明可能含氨基酸、多肽或蛋白质。2）双缩脲反应：取1ml供试液于试管中，加1滴10%氢氧化钠试剂，摇匀，再加0.5%硫酸铜溶液，边加边摇匀，如溶液呈

5、现紫色、红紫色或蓝紫色，表明可能含有多肽或蛋白质。（3）酚类、鞣质类化合物1）三氯化铁反应：取1ml供试液于试管中，加醋酸酸化后，加数滴1%三氯化铁试剂，溶液如呈显绿、蓝绿、蓝黑或紫色，表明可能含有酚性成分或鞣质。2）三氯化铁-铁氰化钾反应：取供试液点于滤纸片上，干燥后，喷洒三氯化铁-铁氰化钾试剂，如立即呈现蓝色，表明可能含有鞣质。喷试剂后应立即观察，若放置一段时间，背景也能逐渐呈蓝色。如欲使纸上的斑点保存下来，在纸片仍湿润时，用稀盐酸洗涤，再用水洗至中性，置室温干燥即可。3）香草醛-盐酸反应：取供试液点于滤纸片上，干燥后，喷洒香草醛-盐酸试剂

6、，如立即呈不同程度的红色，表明含有间苯二酚和间苯三酚结构的化合物。（4）有机酸类1）pH试纸反应：取供试液，以广泛pH试纸测试，如呈酸性，表明可能含有有机酸或酚类成分。2）溴酚蓝反应：取供试液点于滤纸片上，喷洒0.1%溴酚蓝试剂的70%乙醇溶液，如在蓝色背景上产生黄色斑点，表明可能含有有机酸。如显色不明显，可再喷雾氨水，然后暴露于盐酸蒸气中，背景逐渐由蓝色变成黄色，而有机酸的斑点仍为蓝色。（5）皂苷类1）泡沫反应：取2ml供试液于试管中，剧烈振摇2分钟，如产生大量持久性泡沫，再把溶液加热至沸或加入乙醇，再振摇，如仍能产生多量持久性泡沫，表明可能

7、含有皂苷。2）溶血反应：取供试液点于滤纸片上，干燥后，加1滴2%红细胞试液，数分钟后，如在红色背景中出现白色或淡黄色斑点，表明可能含有皂苷。本实验也可在试管中进行。上述试剂如没有，可购买各１瓶。第三次实验（八个学时）进行理化鉴定，主要是薄层色谱（ＴＬＣ）鉴别。自行设计提取方法，自行选择薄层色谱条件。所需化学试剂、试药：薄层层析用硅胶Ｇ：５瓶、硅胶ＧＦ２５４：５瓶、纤维素钠1瓶、茚三酮１瓶、硫酸2瓶、盐酸1瓶、冰醋酸1瓶、甲醇24瓶、乙醇24瓶、乙酸乙酯24瓶、石油醚（60-90℃）24瓶、正己烷24瓶。