微量蛋白沉淀浓缩试剂系列产品.doc

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1、技术咨询电话：400-607-9999微量蛋白沉淀浓缩试剂系列产品ProteinPrecipitationKitSeries货号：P060053产品及特点本系列产品用于微量沉淀浓缩蛋白质样品，其原理是通过酸或有机溶剂使蛋白质变性，溶解度降低，在离心条件下沉淀，而达到蛋白变性、蛋白浓缩、蛋白去盐的目的。他们还有一个重要的用途是去除污染的盐离子和其他小分子。本系列产品名单如下：产品编号产品名称最低浓度备注ATCA蛋白沉淀浓缩试剂5ug/mLBTCA-DOC蛋白沉淀浓缩试剂1ug/mL样品不得含SDSCTCA-丙酮蛋白沉淀浓缩试剂

2、5ug/mL2D胶样品制备D酮蛋白沉淀浓缩试剂5ug/mL规格及成分名称及编号成份20次包装TCA蛋白沉淀浓缩试剂81217A溶液A0.4mL溶液B10mL使用手册1份TCA-DOC蛋白沉淀浓缩试剂81217B溶液A0.4mL溶液B2mL使用手册1份TCA-丙酮蛋白沉淀浓缩试剂81217C溶液A8mL溶液B0.4mL使用手册1份丙酮蛋白沉淀浓缩试剂81217D溶液A20mL使用手册1份注意：本制品仅供研究使用，请勿用于临床治疗等其他用途技术咨询电话：400-607-9999运输及保存常温运输和保存，有效期一年。使用方法一：T

3、CA蛋白沉淀浓缩试剂使用手册1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品（浓度不低于5ug/mL）转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。2、加入20μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。3、冰上放置30分钟或-20℃放置15分钟（过夜放置也可）。4、室温12000-15000×g离心15分钟。5、小心移弃上清液，得沉淀。6、在沉淀中加入500μL溶液B，轻轻混匀。7、室温12000×g离心15分钟。8、小心移弃上清液，得沉淀。9、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有沉淀物的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右

4、。10、样品放4℃保存或立即电泳检测。二：TCA-DOC蛋白沉淀浓缩试剂使用手册1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品（浓度不低于1ug/mL，不得含SDS）转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。2、加入20μL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。3、室温放置10分钟。4、加入10μL溶液B，轻轻混匀。5、室温12000×g离心5分钟。6、小心移弃上清液，得沉淀。7、短暂离心，小心移弃残留上清液后，将有沉淀物的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。注意：本制品仅供研究使用，请勿用于临床治疗等其他用途技术咨

5、询电话：400-607-99998、样品放4℃保存或立即电泳检测。三：TCA-丙酮蛋白沉淀浓缩试剂使用手册1、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品溶液转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。2、加入400uL溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。3、-20℃放置2小时分钟（过夜放置也可）。4、4℃270000×g离心10分钟。5、小心移弃上清液，得沉淀。将有沉淀物的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。6、在沉淀中加入50μL溶液B溶解沉淀。7、样品放4℃保存或立即电泳检测。四：丙酮蛋白沉淀浓缩试剂使用手册1、

6、将200μL需要沉淀浓缩的蛋白样品溶液转移到一个自备的1.5mL塑料离心管中。2、加入1mL在-20℃预冷的溶液A，涡旋激烈震荡10-30秒混匀。3、-20℃放置10分钟（对浓度低于5ug/mL的样品可以过夜放置）。4、室温12000×g离心15分钟（对浓度低于5ug/mL的样品可以将离心改为27000×g离心15分钟）。5、小心移弃上清液，得沉淀。6、将有沉淀物的离心管敞开放置在冰上，空气晾干。一般需要10分钟左右。7、样品放4℃保存或立即电泳检测。技术资料TCA与蛋白质TCA与蛋白质之间主要有以下几个方面的作用:①在酸性

7、条件下与蛋白质形成不溶性盐.②作为蛋白质变性剂使蛋白质构象发生改变，暴露出较多的疏水性基团，使之聚集沉淀.③随着蛋白质分子量的增大，其结构复杂性与致密性越大，TCA可能渗入分子内部而使之较难被完全除去，在电泳前样品加热处理时可能使蛋白质结构注意：本制品仅供研究使用，请勿用于临床治疗等其他用途技术咨询电话：400-607-9999发生酸水解而形成碎片，而且随时间的延长这一作用愈加明显.④电泳图谱显示，BSA，HSA单体谱带有较明显的展宽现象，这可能是由于TCA的结合，使SDS与蛋白质的结合量产生偏差，从而造成蛋白质所带电荷的不

8、均一性，造成迁移率的不一致.我们认为在电泳时使用TCA对蛋白质样品的浓缩或除盐时，对于分子质量大的蛋白质，要慎重选择TCA.对小分子量蛋白质的浓缩，采用TCA时也有两点需要注意:一是用TCA沉淀后，尽量用丙酮彻底抽提TCA;二是样品处理后要尽快进行电泳分析，以免发生聚集及断裂，造成结果分析